限制性内切酶BaeI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 限制性内切酶酶切位点：(10/15)ACNNNNGTAYC(12/7)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus）SDZ-8（R. Morgan）的 BaeI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg Lambda DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 50%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 50%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  在不同温度下的活性

  @25℃: 100%

• 注意事项
  1. BaeI 切割 DNA 底物两次，切下其识别位点后产生一个 28 碱基对的片段，该片段包含 5 个碱基的 3´ 突出端。
  2. BaeI 除了在其确定的切割位点处切割，也能在其识别位点外的一个碱基对处进行切割。
  3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。