限制性内切酶BclI-HF

高保真（HF^®）限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性，但经过改造后显著降低星号活性，并使用统一的缓冲液（rCutSmart^™ 缓冲液）。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较，虽然价格相同，但性能和性价比更高：

• 为提高性能进行基因工程改造
• 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性
• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 降低星号活性
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：T/GATCA

高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标，可在更宽的条件下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，并且为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自热容芽孢杆菌（Bacillus caldolyticus）（A. Atkinson）并经修饰的 BclI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA（dam^–）所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 100%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 阻断酶切
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  BclI
  FbaI
  Ksp22I
  

• 注意事项
  1. BclI-HF 的特异性与 BclI（NEB #R0160）相同，但经过改造后星号活性降低。
  2. 切割产生的 5´ GATC 突出末端可以与 BamHI、BglII、MboI、Sau3AI 和 BstYI 切割产生的 DNA 片段有效地连接。
  3. dam 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息，请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。