限制性内切酶BpmI

• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割

• 酶切需要两个或两个以上识别位点。请查看下表中的酶列表和使用建议以及背景信息文章。

• 限制性内切酶酶切位点：CTGGAG(16/14)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus）（S.K. Degtyarev）的 BpmI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，在 37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer™ r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 75%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  200 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  GsuI
  

• 注意事项
  1. BpmI 是 GsuI 的同裂酶。
  2. 因为反应中酶的稳定性，即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率，除非增加酶量。如需了解更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
  3. 酶切需要两个或两个以上识别位点。请查看下表中的酶列表和使用建议以及背景信息文章。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
  5. 延时酶切可能产生星号活性。