限制性内切酶BpuEI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 限制性内切酶酶切位点：CTTGAG(16/14)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自短小芽胞杆菌（Bacillus pumilus 2187a）（C. Nkenfou）的 BpuEI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 50%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 50%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  300 mM NaCl
  10 mM Tris-HCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
  50% Glycerol
  500 µg/ml BSA
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  Bce83I+
  

• 注意事项
  1. 在 NEBuffer r1.1 和 NEBuffer r3.1 缓冲液中可能出现星号活性。
  2. 基于反应中酶的稳定性，除非增加酶量，否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
  3. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
  4. BpuEI 需要在反应混合物中加入 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）以实现**活性（SAM 已添加在酶溶液中）。