限制性内切酶BceAI

• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 限制性内切酶酶切位点：ACGGC(12/14)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）1315（C. Nkenfou）的 BceAI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer™ r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 100%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 阻断酶切

  同裂酶

  BcefI+
  

• 注意事项
  1. 在 NEBuffer r1.1、r2.1 和 rCutSmart 缓冲液中可能出现星号活性。
  2. CpG 甲基化阻断酶切。
  3. 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性