限制性内切酶AleI-v2

在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切

• 限制性内切酶酶切位点：CACNN/NNGTG

AleI-v2 是 AleI 经基因工程改造的优化版本。（NEB 在名称中使用“v2”或“HF”来表示经基因工程改造的酶。）

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自液化金杆菌（Aureobacterium liquefaciens）（S.K. Degtyarev）并经修饰的 AleI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: <10%
  NEBuffer™ r2.1: <10%
  NEBuffer™ r3.1: <10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  200 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠影响酶切

  同裂酶

  OliI
  

• 注意事项
  1. AleI-v2 是 OliI 的完全同裂酶。
  2. CpG 甲基化影响酶切。登陆“Dam-Dcm 和 CpG 甲基化”查看更多信息。
  3. AleI-v2 与 AleI（NEB #R0634）特异性相同，但 AleI-v2 已经过改造，可在 -20℃ 下有更高的稳定性。