限制性内切酶AsiSI

• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），简化双酶切
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：GCGAT/CGC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自节杆菌属（Arthrobacter）（S.K. Degtyarev）的 AsiSI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg XhoI 消化的 pXba 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 100%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 25%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 阻断酶切

  同裂酶

  RgaI
  SfaAI
  SgfI
  

• 注意事项
  1. AsiSI 是 SgfI 的同裂酶。
  2. dam 甲基化不能阻断酶切。CpG 甲基化阻断对哺乳动物基因组 DNA 酶切。
  3. 延时酶切可能产生星号活性。