限制性内切酶ApeKI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：G/CWGC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有超嗜热需氧古生菌（Aeropyrum pernix）K1（ATCC 700893）的 ApeKI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，75℃ 下，1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ r3.1
  Incubate at75℃

  1X NEBuffer™ r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 25%
  NEBuffer™ r2.1: 50%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 10%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

  同裂酶

  TseI
  

  在不同温度下的活性

  @37℃: 10%

• 注意事项
  1. ApeKI 是 TseI 的同裂酶。
  2. ApeKI 是一种高热稳定性限制性内切酶，在温度高达 95℃ 时仍有活性。95℃ 条件下，ApeKI 的半衰期为 20 分钟。
  3. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。
  4. CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。