产品说明
一般描述
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
DIG DNA标记试剂盒是使用洋地黄苷-脱氧尿苷三磷酸(dUTP)和随机寡核苷酸作为引物对DNA进行标记的一种便捷试剂盒。在该方法中,Klenow聚合酶使用随机寡核苷酸的3′-OH末端作为引物,合成变性DNA的互补DNA链。
特异性
热灭活:通过加入2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)和/或加热至65℃ 10分钟来终止反应。
应用
可与碱不稳定性DIG-11-dUTP一起用于DNA探针随机引物标记。DIG标记的DNA探针可用于:
- 根据特殊杂交溶液DIG Easy Hyb的包装说明书中所提供的标准实验方案,进行所有类型的滤膜杂交。
- 即使在复杂程度很高的生物中(例如,人类、大麦和小麦),也可以在总基因组DNA中进行单拷贝基因检测。
- 原位 杂交
包装
1个试剂盒包含7种组分。
质量
已通过Southern印迹测试功能。
产品规格
检测时间:标记:1小时至O/N
敏感性和特异性:在对消化后的1 μg人胎盘DNA进行Southern印迹检测时,可用DIG标记的探针检测人单拷贝基因(tPA基因)。
原理
根据随机引物DNA标记法产生DIG标记的DNA探针,该方法基于随机寡核苷酸与变性DNA模板的杂交。Klenow酶使用随机寡核苷酸的3′-OH末端作为引物,使用含有碱不稳定性DIG-11-dUTP的脱氧核糖核苷酸的混合物进行延伸,从而合成互补DNA链。这个过程将洋地黄毒苷掺入到新合成的DNA中。
注意:
- 使用碱不稳定性DIG-11-dUTP可以更容易、更有效地剥离印迹,以用第二DIG标记探针进行再杂交实验。
- 碱不稳定性DIG-11-dUTP标记的DNA探针不能用NaOH变性,但可以通过水浴煮沸变性。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
产品性质
用途 | sufficient for 40 labeling reactions |
质量水平 | 100 |
包装 | kit of 1 (7 components) |
manufacturer/tradename | Roche |
环保替代产品特性 | Designing Safer Chemicals Learn more about the Principles of Green Chemistry. |
technique(s) | hybridization: suitable |
环保替代产品分类 | Aligned |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
Unlabeled Control DNA 1 100 µg/ml | |
Unlabeled Control DNA 2 100 µg/ml | |
DNA Dilution Buffer | |
DIG-labeled Control DNA 5.2 µg/ml | |
Hexanucleotide Mix 10x concentrated | |
dNTP Labeling Mixture 10x concentrated | |
Klenow Enzyme, Labeling grade 2 U/µl |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |