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DNase I recombinant, RNase-free

重组DNase I,无RNase

品牌
Roche
货号
04716728001
规格纯度
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
参考价格
3595.84 *本价格含增值税费
促销
数量
-+
产品介绍:

产品说明

一般描述

重组DNase I是一种DNA特异性内切酶。该酶可通过水解连接到DNA上的磷酸二酯而催化双链及单链DNA的随机降解,形成寡核苷酸和单核苷酸的混合物。重组DNase I的生产过程中所使用的所有材料都无动物来源,因而可形成无动物源产物。

内容物

  • 重组DNasae I,不无RNase,10 U/μl
  • 孵育缓冲液,10x浓度

特异性

热灭活:一单位无RNase重组DNase I可在75 ℃孵育10分钟进行热灭活。

重要提示:无RNase重组DNase I也可根据标准实验方案通过酚提取进行灭活并去除,分子生物学中的现有实验方案。

应用

在对RNase较为敏感的应用中,可采用无RNase的重组DNase I降解DNA。例如,DNase I常用于:

  • 在RT-PCR之前去除RNA中的基因组DNA
  • 体外转录反应之后分离不含DNA的RNA
  • 进行缺口翻译
  • 在真核DNA中定位DNase敏感的区域

特点和优势

  • 可从任意RNA样品中去除DNA污染
  • 未检测出RNase或蛋白酶活性
  • 可热灭活,因而免去了有机提取的必要
  • 通过优化的孵育缓冲液进行运输,以最大限度维持DNase活性
  • 完全无动物来源过程生产,去除了动物来源材料相关的任何风险

包装

1个试剂盒包含2种组分

质量

杜绝污染:每批次都按照现有质检工艺检测以确保无RNase及蛋白酶。

产品规格

糖基化形式
重组DNase I异质性N端糖基化,因此会在电泳时呈现两条带。
二价离子要求
DNase I需要二价阳离子以实现最高活性。DNA特异性内切酶通过镁离子等离子激活,并由钙离子刺激。因此,酶会受到EDTA等金属螯合剂抑制。

单位定义

一单位指的在1ml的检测条件下可造成260 nm处吸光值提高0.001/min的酶活性。
反应条件:
根据以下检测混合物测定体积活性。将100 μg小牛胸腺DNA与40至70单位的无RNase重组DNase I在1x孵育缓冲液中+ 25℃下孵育。测定260nm处吸光度增量。

制备说明

激活剂:二价金属离子
工作溶液:储备溶液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,2 mM CaCl2,2 mM MgCl2,1mM二硫赤藓糖醇,0.1 mg/ml Pefabloc SC,50% 甘油(v/v),pH 7.6 (4 ℃)。
孵育缓冲液(10x):400 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,60 mM MgCl2 10 mM CaCl2,pH 7.9。
酶稀释液:25 mM Tris-HCl,50%甘油(v/v),pH 7.6 (4 ℃)。

储存及稳定性

将未稀释的酶溶液-15至-25℃储存;缓冲液4℃储存。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

基本信息

酶学委员会(EC)编号3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )

产品性质

质量水平100
生物来源bovine pancreas
重组expressed in Pichia pastoris
形式solution
分子量 ~39 kDa
包装pkg of 10,000 U
manufacturer/tradenameRoche
最佳pH7.0-8.0
运输dry ice

安全信息

储存分类代码12 - Non Combustible Liquids
WGKWGK 1
闪点(F)does not flash
闪点(C)does not flash

Sigma-Aldrich

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