产品说明
一般描述
来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes )的重组dCas9-3X FLAG-生物素蛋白(~165KD)是用于基因组工程和基因组DNA检测、分离和成像实验的即用型试剂。当与靶点特异性向导RNA结合时，死亡的酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes )Cas9蛋白作为DNA靶标蛋白，适用于转染细胞培养物、显微注射、DNA下拉、染色质富集、微生物鉴定和原位DNA成像。在C末端，使用SV40大T抗原核定位信号(NLS)标记蛋白质以用于入核转运，使用3XFLAG表位和生物素标记蛋白质以用于基于FLAG抗体®或链霉抗生物素的实验。
应用
功能基因组学/靶标验证/基因组编辑/分子生物学/合成生物学/DNA检测/分离/DNA成像
特点和优势
- 高特异性
- 适用于基因组DNA检测/分离
- 可立即用于注射/转染
包装
- 50 μg包装(≥ 300 pmol)
- 250 μg包装(≥ 1500pmol)
组分
每个试剂盒包含：
- 一瓶dCas9重组蛋白
- 一瓶1×稀释缓冲液，1 mL
- 一瓶无核酸酶的水和甘油，1 mL
原理
CRISPR/Cas体系被细菌和古细菌用作抵抗入侵病毒和质粒的防御屏障。最近，来自化脓性链球菌( Streptococcus pyogenes )的II型CRISPR/Cas系统经过设计可用于真核系统，它采用两种分子组分：单个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA)。两个蛋白质结构域RuvC和HnH(分别为D10A和H840A)负责核酸酶活性，它们发生突变会导致Cas9内切核酸酶失活(dCas9)。随后，可以用gRNA对蛋白质进行编程，并指导其与所需的DNA序列结合。
重悬
dCas9蛋白冻干粉应使用提供的复原(Reconstitution)溶液重悬，获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。
其他说明
利用我们的 CRISPR选择工具 订购gRNA
访问SigmaAldrich.com/CRISPRproteins，查看我们的其他 MISSION® Cas9 蛋白
法律信息
CRISPR使用许可协议
FLAG is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC
MISSION is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
| NACRES | NA.51 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 重组 | expressed in E. coli |
| 测定 | ≥90% (SDS-PAGE) |
| 形式 | lyophilized powder |
| 包装 | pkg of 1 kit (3 components) |
| 运输 | ambient |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
| WGK | WGK 3 |
