限制性内切酶XcmI

• 限制性内切酶酶切位点：CCANNNNN/NNNNTGG

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自野油菜黄单胞菌（C. Polisson）的 XcmI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，在 37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ r2.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer™ r2.1
  50 mM NaCl
  10 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 10%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 25%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 C

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  250 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  0.15% Triton® X-100
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

• 注意事项
  1. XcmI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基突出的 3´末端，它比平末端更难连接。
  2. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
  3. 延时酶切可能产生星号活性。