限制性内切酶DpnI

• 只有当识别位点被甲基化时，DpnI 才能切割。
• 哺乳动物基因组 DNA 的 CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
• 甲基化敏感的限制性内切酶
• 符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：GA/TC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）G41（S. Lacks）的 DpnI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA（dam 甲基化）所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 100%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 75%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

  同裂酶

  MalI
  

• 注意事项
  1. 只有当识别位点被甲基化时，DpnI 才能酶切。从 dam^₊ 菌株纯化而来的 DNA 才是 DpnI 的酶切底物。
  2. CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。