限制性内切酶DpnII

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 限制性内切酶酶切位点：/GATC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带来自肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）G41（S. Lacks）的 DpnII 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA（dam-）所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ DpnII
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer™ DpnII
  50 mM Bis-Tris-HCl
  100 mM NaCl
  10 mM MgCl₂
  0.1 mM DTT
  (pH 6 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 25%
  NEBuffer™ r2.1: 25%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 25%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 阻断酶切
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  Bsp143I
  BssMI
  BstKTI
  BstMBI
  Kzo9I
  MboI
  NdeII
  Sau3AI
  

• 注意事项
  1. DpnII 和 Sau3AI 是 MboI 的完全同裂酶。
  2. 切割产生 5´ GATC 突出末端，该末端可高效地连接由 BamHI、BclI、BglII、MboI、Sau3AI 和 BstYI 酶切生成的 DNA 片段。
  3. dam 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息，请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。
  4. 在 NEBuffer r3.1 缓冲液中可能出现星号活性。推荐使用 NEB DpnII 专用缓冲液。