限制性内切酶CspCI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割

• 酶切需要两个或两个以上识别位点。请查看下表中的酶列表和使用建议以及背景信息文章。

• 限制性内切酶酶切位点：(11/13)CAANNNNNGTGG(12/10)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自柠檬酸杆菌属（Citrobacter）2144（C. Nkenfou）的 CspCI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  使用浓度

  5,000 units/ml

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 10%
  NEBuffer™ r2.1: 100%
  NEBuffer™ r3.1: 10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

• 注意事项
  1. CspCI 在其识别序列的两侧进行切割，切下来一个含 2 碱基 3´ 突出末端的 ～35 bp 的片段。
  2. 酶切位点可能会左右移 1 个碱基，具体取决于识别位点两侧的 DNA 序列和酶切条件。
  3. 酶切需要两个或两个以上识别位点。请查看下表中的酶列表和使用建议以及背景信息文章。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
  5. CspCI 需要在反应中添加 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）以实现**活性（SAM 已添加在酶溶液中）。