染料法丝状支原体丝状亚种实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides SC

货号：Mqs-msc-20      规格：20个反应

货号：Mqs-msc-50      规格：50个反应

货号：Mqs-msc-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    特异性检测丝状支原体丝状亚种，与其他生物基因组没有交叉反应。

2，    灵敏度高，检测极限相当于7-13个CFU/反应。

3，    采用热启动DNA聚合酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，    带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

6，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

丝状支原体丝状亚种小克隆（Mycoplasma mycoides subsp. mycoides SC，简称MmmSC）属于丝状支原体族，是牛传染性胸膜肺炎（CBPP，一种严重的呼吸道传染病，又称牛肺疫、烂肺疫）的致病菌，营专性寄生生活。与寄生生活相适应，其代谢网络极度简化，完全依赖宿主提供的营养物质生存，缺乏完整的糖酵解后途径（如TCA循环和氧化磷酸化），能量代谢主要依赖糖酵解，将葡萄糖转化为乳酸，同时产生少量ATP。此外，该菌无法合成大多数氨基酸、脂肪酸和胆固醇，必须从宿主血清中摄取。胆固醇是其细胞膜的关键成分，但由于缺乏合成途径，高度依赖宿主提供。甘油代谢是其致病性的关键因素之一。MmmSC表达甘油激酶（glpK）和甘油-3-磷酸氧化酶（glpO），可将甘油转化为二羟基丙酮磷酸（DHAP），同时产生过氧化氢（H₂O₂）。H₂O₂ 可诱导宿主细胞氧化应激，导致组织损伤和炎症反应，促进疾病发展。此外，MmmSC缺乏有效的抗氧化系统，使其对宿主体内的氧化环境高度敏感，这可能限制其在宿主体外的存活能力。

MmmSC的实验室检测已形成多层次的体系。传统培养法使用改良的Hayflick或PPLO培养基，在微需氧条件下培养2-7天，通过观察典型的"煎蛋状"菌落进行初步鉴定，但该方法灵敏度较低且耗时长，难以满足快速检测需求。血清学方法如补体结合试验（CFT）和ELISA可用于检测感染动物血清中的特异性抗体，但存在与其他支原体的交叉反应问题。分子生物学检测已成为目前的主流方法，针对保守基因的常规PCR可快速鉴定病原体，而实时荧光定量PCR（qPCR）进一步提高了检测灵敏度和定量能力，尤其适用于组织样本或鼻拭子中的低载量检测。

由于其他的PCR方法多选择一些变异很少的靶点区域，染料法丝状支原体丝状亚种实时定量PCR试剂盒通过将MmmSC与亲缘关系最近的MmmLC的基因组进行比较，选取一段变异较多的区域作为靶点，特异性识别MmmSC，经BLAST验证，与其他生物基因组没有交叉反应。本试剂盒检测了分布范围或亲缘关系较近的8种支原体，未发现非特异信号。本试剂盒可用于检测和鉴定MmmSC。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。