染料法绵羊肺炎支原体实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma ovipneumoniae

货号：Mqs-opn-20      规格：20个反应

货号：Mqs-opn-50      规格：50个反应

货号：Mqs-opn-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    特异性识别绵羊肺炎支原体，与其他生物基因组没有交叉反应。

2，    灵敏度高，最低检测极限为反应液中22个基因组。

3，    使用热启动的DNA聚合酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，    带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

6，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

绵羊肺炎支原体（Mycoplasma ovipneumoniae）是一种可以感染羊的呼吸道病原体，可以在绵羊、山羊以及一些野生小型反刍类动物中引起羊支原体肺炎（又称羊传染性胸膜肺炎、非进行性肺炎），其代谢特征鲜明地体现了对宿主呼吸系统的特殊适应策略。能量代谢方面，由于缺乏完整的三羧酸循环和电子传递链，绵羊肺炎支原体主要依赖不完全糖酵解途径获取能量，终产物多为乳酸和丙酮酸等有机酸。这种低效的产能方式与其在肺部相对缺氧环境中的生存策略相契合，同时也可能通过代谢产物的积累改变局部微环境pH值，影响宿主防御功能。氨基酸代谢方面表现出显著的不完整性，基因组分析显示其缺乏多种必需氨基酸（如芳香族氨基酸和含硫氨基酸）的合成酶系，必须通过特定的氨基酸转运系统从宿主获取现成的氨基酸，这种代谢缺陷决定了其严格的寄生生活方式。脂质代谢方面，绵羊肺炎支原体完全丧失胆固醇自主合成能力，必须从宿主细胞膜获取胆固醇以维持自身细胞膜的流动性和稳定性。这种特性解释了为何其主要定植于富含胆固醇的呼吸道粘膜表面。研究发现其可能分泌磷脂酶等代谢酶来修饰宿主细胞膜成分，这一过程既获取必需营养又促进组织损伤。在核苷酸代谢方面，其嘌呤和嘧啶补救合成途径也存在明显缺陷，必须依赖宿主提供的核苷前体进行核酸合成。特别值得注意的是，绵羊肺炎支原体的精氨酸脱亚胺酶途径相对完整，可通过精氨酸代谢产生氨和ATP，这一独特代谢特征不仅为其在精氨酸丰富的肺组织中提供竞争优势，产生的氨还可能通过破坏上皮细胞屏障促进感染进程。

这种高度特化的代谢模式虽然限制了绵羊肺炎支原体的独立生存能力，却使其在呼吸道特定生态位中获得显著优势。在感染过程中，绵羊肺炎支原体通过精细调控代谢产物的分泌（如过氧化氢和蛋白酶）来破坏呼吸道上皮功能，同时改变局部微环境以利于自身增殖。这种代谢适应性与致病机制的紧密关联，为理解其引起慢性肺炎的分子基础提供了重要线索，也为开发靶向代谢干预策略指明了方向。

绵羊肺炎支原体的实验室检测已建立了多层次的方法体系，以满足不同场景下的检测需求。病原分离培养作为传统方法，能获得活菌株用于后续研究，但由于生长缓慢（需14-21天）且对培养条件要求苛刻，其检出率往往不足50%，限制了应用价值。血清学检测主要包括补体结合试验（CFT）和酶联免疫吸附试验（ELISA），通过检测血清中的特异性抗体进行判断，但存在抗体产生滞后性（感染后3-4周才可检出）和与其他支原体交叉反应的局限性。分子生物学检测技术因其快速、敏感的特性已成为主流检测方法。常规PCR和实时荧光定量PCR（qPCR）针对特异性基因设计引物，可达到很高的特异性，灵敏度可达10-100个基因组拷贝/反应，在数小时内即可完成检测。

染料法绵羊肺炎支原体实时定量PCR试剂盒针对黏附素蛋白基因进行PCR鉴定，引物经BLAST验证为特异性靶向绵羊肺炎支原体。使用本试剂盒检测了分布范围类似的多种支原体和细菌，以及拭子或动物组织样本，证实本试剂盒具有良好的绵羊肺炎支原体特异性，适用于绵羊肺炎支原体的检测。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。