染料法丝状支原体实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma mycoides

货号：Mqs-myc-20      规格：20个反应

货号：Mqs-myc-50      规格：50个反应

货号：Mqs-myc-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    特异性检测丝状支原体（MmmSC、MmmLC和Mmc），与其他生物基因组没有交叉反应。

2，    灵敏度高，检测极限相当于100fg/反应。

3，    采用热启动DNA聚合酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，    带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

6，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

丝状支原体（Mycoplasma mycoides）是一类专性寄生的无细胞壁细菌，根据宿主偏好和致病特性可分为多个亚种。其中**代表性的是丝状支原体丝状亚种小克隆（M. mycoides subsp. mycoides SC，简称MmmSC），作为牛传染性胸膜肺炎（CBPP）的病原体，主要感染牛类并引发严重的肺部病变；而丝状亚种大克隆（M. mycoides subsp. mycoides LC，简称MmmLC）则表现出更广泛的宿主范围，可感染山羊和绵羊。另一重要亚种是丝状支原体山羊亚种（M. mycoides subsp. capri），主要侵袭山羊和绵羊，导致多系统疾病如肺炎、关节炎和乳腺炎。此外，分类学上相关的山羊支原体山羊肺炎亚种（M. capricolum subsp. Capripneumoniae，简称Mmc）虽已独立归类，但仍与丝状支原体群存在密切的生物学关联。

这些亚种具有相似的生物学特征，均呈现典型的多形性形态，直径不足1微米，可表现为球状、丝状或分枝状结构。其最显著的特征是完全缺乏细胞壁，仅由三层细胞膜包裹，这一特性使其对渗透压敏感，但对β-内酰胺类抗生素天然耐药。基因组高度精简（0.9-1.3 Mb），编码不足1000个基因，反映了对宿主环境的深度适应。代谢能力缺陷严重，缺乏三羧酸循环和电子传递链，必须从宿主体内获取胆固醇、氨基酸等必需营养物质。不同亚种通过特异的毒力因子适应各自宿主，如MmmSC亚种依赖甘油代谢产生过氧化氢引发组织损伤，而Mmc亚种则通过表面脂蛋白变异逃避宿主免疫。这些微生物在宿主的呼吸道、乳腺等部位可建立持续性感染，其慢性病理过程给畜牧业生产造成显著经济损失。

丝状支原体及其亚种的检测需要综合运用多种技术手段以满足不同场景的检测需求。在传统培养方法中，采用富含血清和胆固醇的专用培养基（如改良Hayflick培养基）进行微需氧培养，通过观察特征性的"煎蛋状"菌落进行初步鉴定，但该方法灵敏度有限且耗时长达2-7天。分子检测技术已成为主流诊断手段，针对保守基因的常规PCR可快速筛查阳性样本，而针对特异性标记的qPCR技术能实现高灵敏度定量检测，尤其适用于组织样本和乳汁等复杂基质。血清学检测通过ELISA或补体结合试验检测宿主抗体，但需注意亚种间可能存在的血清学交叉反应。

染料法丝状支原体实时定量PCR试剂盒通过将几种丝状支原体族成员的基因组进行比较，选取一段共同区域作为靶点特异性识别丝状支原体，包括：MmmSC、MmmLC和Mmc，经BLAST验证，与其他生物基因组没有交叉反应。本试剂盒检测了丝状支原体族六个成员，只有丝状支原体（MmmSC、MmmLC和Mmc）的菌株产生特异性信号，其余成员，以及分布范围相近的其他支原体和细菌，均未产生特异性信号。可见本试剂盒具有特异性，适用于检测丝状支原体的各个亚种。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。