染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit for Universal Hemoplasma

货号：Mqs-hae-20        规格：20个反应

货号：Mqs-hae-50        规格：50个反应

货号：Mqs-hae-100        规格：100个反应

   储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    可作为嗜血支原体通用试剂盒使用，可检测绝大部分目前已知的嗜血支原体。

2，    使用热启动的Taq酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

3，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性，以及验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。

4，    带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

5，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

6，    灵敏度高，可检出反应液中最少达1-10个基因组。

染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒是一种基于荧光染料的分子诊断技术，主要用于快速、灵敏地检测嗜血支原体（Hemotropic mycoplasma，或hemoplasma）的核酸。该技术结合了实时荧光定量PCR（qPCR）的高特异性和高灵敏度，以及DNA结合染料的简便性和通用性，使其成为检测嗜血支原体的重要工具。

嗜血支原体是一类寄生于红细胞表面的微小细菌，曾被命名为附红细胞体（Eperythrozoon）和血巴尔通体/血巴通氏体（Haemobartonella），可感染多种动物，包括猫、狗、猪和牛等，引发贫血、发热和免疫抑制等症状。由于这类病原体难以通过传统培养方法分离，分子检测技术成为诊断的金标准。染料法实时定量PCR利用能与双链DNA（dsDNA）特异性结合的荧光染料（如SYBR Green I），在PCR扩增过程中实时监测荧光信号的累积，从而实现对靶标核酸的定量检测。

试剂盒包含优化的预混液，其中含有热启动DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液和荧光染料，用户只需准备DNA样品即可进行检测。热启动酶能减少非特异性扩增，优化的缓冲体系可提高扩增效率。

在反应过程中，荧光染料会嵌入新合成的dsDNA中，并在特定波长激发下发射荧光信号。随着PCR循环的进行，荧光强度与扩增产物的量成正比，仪器实时记录荧光值并生成扩增曲线。通过阈值循环数（Ct值）可以准确定量起始模板量，Ct值越小表示初始模板浓度越高。熔解曲线分析是染料法的另一关键步骤，通过逐渐升温使PCR产物解链，不同产物因其长度和GC含量差异会呈现特定的熔解温度（Tm），从而验证扩增的特异性并区分非特异性产物或引物二聚体。相比传统PCR，其实时定量能力不仅能判断阳性与否，还能评估病原体载量，为决策提供更全面的依据。

染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒采用SYBR染料法，根据嗜血支原体的16S rRNA基因序列，设计通用引物，可识别寄生于常见哺乳动物（如：猫、犬、猪、牛、羊、鼠等）的所有已知嗜血支原体。通过BLAST验证，本试剂盒与非嗜血支原体的其他物种无交叉反应，个别物种可能产生的非特异信号可通过Tm值排除。

本试剂盒可识别的嗜血支原体包括：Mycoplasma haemofelis、Candidatus Mycoplasma haemominutum、Candidatus Mycoplasma turicensis、Mycoplasma haemocanis、Candidatus Mycoplasma haematoparvum、Mycoplasma suis、Mycoplasma wenyonii、Candidatus Mycoplasma haemobos、Mycoplasma ovis、Mycoplasma haemomuris、Mycoplasma coccoides、Candidatus Mycoplasma haemolamae、Mycoplasma erythrodidelphis、Candidatus Mycoplasma kahanei等。

本产品仅供研究使用，不可用于临床诊断。