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rAPid Alkaline Phosphatase

rAPid碱性磷酸酶

品牌
Roche
货号
RAP-RO
规格纯度
1 units/μg protein, optimum reaction temp. 37 °C
参考价格
979.15 *本价格含增值税费
促销
数量
-+
产品介绍:

产品说明

一般描述

rAPid碱性磷酸酶是从牛肠中分离的碱性磷酸酶,作为在毕赤酵母(Pichia Pastoris)中表达的56kD重组酶提供。重组形式确保了一致性和安全性。rAPid碱性磷酸酶能够催化DNA和RNA、核苷酸和蛋白质的5′磷酸盐的去磷酸化。碱性磷酸酶处理可去除连接酶所需的5′-磷酰基末端,从而防止DNA片段的自我连接;该特性能够减少载体背景,对于克隆策略非常重要。与小牛肠道磷酸酶不同,rAPid碱性磷酸酶在+75 ℃下热处理2分钟,可快速、完全且不可逆地灭活。因此,它是虾碱性磷酸酶的出色替代品。此外,该酶在限制酶缓冲液中具有活性。因此,无需纯化步骤,即可完成限制酶消化、去磷酸化、酶失活、连接或5′-末端标记。

特异性

碱性磷酸酶可以催化许多磷酸酯的水解,如伯醇和仲醇、糖、环醇、酚和胺的酯。与磷酸二酯不反应。该酶能水解无机焦磷酸盐。酶的动力学性质取决于许多因素,如酶的纯度、测定中酶的浓度、缓冲液、pH等。
热灭活:通过在75℃温育2分钟,可以灭活rAPid碱性磷酸酶。

应用

  • rAPid碱性磷酸酶可用于许多应用,包括:从核酸中去除5′-磷酰基
  • 制备用于5′-末端标记的模板
  • 去除dNTP,净化PCR产物
  • 蛋白质的去磷酸化
注意:通过在75℃温育2分钟,可以非常快速地灭活rAPid碱性磷酸酶。在限制性酶切和去磷酸化后不需要其他纯化步骤。去磷酸化的DNA可直接用于连接反应。
注意:快速DNA去磷酸化和连接试剂盒也包含rAPid碱性磷酸酶,该试剂盒能够快速有效地完成去磷酸化并连接粘性或钝端DNA片段。使用这种方便的试剂盒,在+37 ℃下可在10分钟内对钝端和粘性5′-突出末端进行去磷酸化,并在+15–25 ℃下仅需5分钟即可内完成连接。

特点和优势

  • 消除污染风险:重组表达以及可靠且灵敏的质量控制测试确保了高纯度。
  • 用经济的解决方案替代当前的磷酸酶:rAPid碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶或牛碱性磷酸酶等价。
  • 消除动物源性疾病的风险:在毕赤酵母(Pichia pastoris )中表达,可确保一致性和安全性。
  • 快速热灭活的优势:仅需在75℃温育2分钟,即可灭活rAPid碱性磷酸酶。
  • 获得一致的性能:与其他碱性磷酸酶相比,rAPid碱性磷酸酶在储存期间具有出色的稳定性。

包装

1个试剂盒包含2个组分

质量

根据当前的质量控制程序,对所有批次的rAPid碱性磷酸酶进行测试,确保其不含脱氧核糖核酸酶和切割活性。

单位定义

一个rAPid碱性磷酸酶活性单位是指在检测条件下,在+ 37℃,1分钟内水解1 mol 4-硝基苯基磷酸酶所需的酶量。

体积活度:1 U/μl

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

基本信息

酶学委员会(EC)编号3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB )

产品性质

质量水平100
重组expressed in Pichia pastoris
specific activity1 units/μg protein
包装pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl])
pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])
manufacturer/tradenameRoche
参数37 ℃ optimum reaction temp.
运输dry ice
储存温度−20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号组份
rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl

安全信息

储存分类代码12 - Non Combustible Liquids
WGKWGK 1
闪点(F)does not flash
闪点(C)does not flash

Sigma-Aldrich

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