产品说明

一般描述

转录因子NFkappaB(Nuclear Factor kappa B)可参与许多重要细胞和生理过程的表达和调控，例如生长、发育、凋亡、免疫和炎症反应以及各种病毒启动子(包括人类免疫缺陷病毒长末端重复序列)的激活。NFkappaB代表一组与原癌基因c-Rel有关的结构相关且在进化上保守的蛋白质，在哺乳动物中有5个成员，包括Rel(cRel)、RelA(p65)、RelB、NFkappaB1(p50及其前体p105)和NFkappaB2 (p52及其前体p100)。NFkappaB/Rel蛋白以同二聚体或异二聚体的形式存在，以形成转录感受态或阻抑复合物。尽管大多数NFkappaB二聚体是转录激活因子，但p50/50和p52/52同二聚体可以抑制其靶基因的转录。NFkappaB的p50/p65异二聚体在细胞中含量最高。

特异性

可识别与NFkB异二聚体的p65亚基的核定位信号(NLS)重叠的表位。因此，它可选择性地与NFkB的活化形式进行结合(Zabel等，1993)。该抗体也可用于凝胶迁移(EMSA)。核因子kB(NFkB)是一种序列特异性DNA结合蛋白(Sen & Baltimore，1986)。它是一种多效转录因子，可参与多种细胞和病毒基因的表达(Lenardo & Baltimore, 1989)。NFkB由两个亚基组成，根据其分子量分别命名为p50和p65(Kawakami等, 1988)。亚基通过所谓的抑制链IkB进行稳定(Baeuerle & Baltimore, 1988)。在静止细胞中，NFkB以无活性形式存在于细胞质中，可以通过使用细胞因子或蛋白激酶激活剂处理细胞来进行体内激活。在体外，可以通过使用脱氧胆酸钠、福尔马丁或电泳分级分离法处理来产生活性形式的NFkB。NFkB的活性形式是一种异四聚体蛋白，由两个p50和两个p65亚基组成(Lenardo等，1987)。激活后，NFkB可从胞质溶胶转移到细胞核，与特定的DNA序列结合并启动转录。

免疫原

表位：p65亚基，活性亚基
对应BSA偶联人p65的多肽。

应用

研究子类别
转录因子
使用已在EMSA、FC、ICC、IF、IHC、IHC(P)、WB中得到验证的抗NFκB抗体，p65亚基，活性亚基，克隆12H11(小鼠单克隆抗体)对NFκB(也称为RelA)进行检测。
免疫荧光：
浓度为1-10 μg/mL的先前批次已被用于免疫荧光中。

免疫组织化学(石蜡切片)：
浓度为5-10 μg/mL(APAAP)的先前批次已被用于免疫组化中。

免疫组织化学(冷冻切片)：
浓度为5-10 μg/mL(APAAP)的先前批次已被用于免疫组化中。

免疫组织化学：
克隆12H11在新鲜的冷冻或丙酮固定的人体组织中效果最好，但是当组织是人源时，某些组别会在传统的福尔马林固定的组织中具有反应性。建议在丙酮或福尔马林固定组织中采用ABC或增强型检测系统以实现最佳可视化。该抗体与人体组织的反应最佳。大鼠组织也会发生反应，但亲和力较低，并且该抗体不会与小鼠反应，其他物种尚未进行检查。微波柠檬酸缓冲液或胰蛋白酶消化抗原回收均已成功地与12H11一起用于福尔马林固定组织上。

免疫印迹: 5-10 µg/mL(ECL)

电泳迁移率超迁移测定：
浓度为0.5-1 μg/mL的先前批次已被用于超迁移测定中。

流式细胞术：
先前批次的该抗体已被用于流式细胞术中。仅用于固定细胞(丙酮固定细胞)。

最佳工作稀释液必须由最终用户进行确定。
研究类别
表观遗传学&核功能

质量

通过免疫印迹对PC12裂解物进行常规评估。

免疫印迹：
该批次的1：500稀释液对10 μg PC12裂解物中的NF KAPPA B、P65进行检测。

目标描述

65kda

外形

形式：纯化
纯化的蛋白 A
纯化的小鼠单克隆IgG3溶液，溶于含0.02 M磷酸盐缓冲液(pH 7.6)、0.25 M NaCl、和0.1％叠氮化钠的缓冲液中。

储存及稳定性

自收到之日起在2-8ºC可稳定保存6个月。
避免反复冻融。为了最大程度地回收产品，在融化后和取下盖子之前，将原始样品瓶进行离心。

分析说明

对照
TNFα处理的HeLa细胞，PMA和钙离子载体处理的Jurkat细胞。

其他说明

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

法律信息

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免责声明

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明，否则我们的产品仅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

基本信息

产品性质