产品说明

一般描述

Tau是一种微管结合蛋白，可稳定生长中的轴突中的微管，其会在成对的螺旋丝(PHF)中被过度磷酸化，成对的螺旋丝(PHF)是与阿尔茨海默症’相关的神经原纤维病变的主要纤维成分。Tau的过度磷酸化被认为是导致PHF组装的关键事件。已经鉴定出六种Tau蛋白同工型，所有这些同工型都可被糖原合酶激酶3(GSK 3)磷酸化。细胞和亚细胞定位：原位抗tau-1抗体对神经元轴突具有严格的特异性。该抗体不会对细胞体或神经元树突进行染色，也不会对任何其他细胞类型进行染色(4)。但是，这种体内细胞内特异性在培养中并未得到维持：抗tau-1抗体可染色培养中生长的大鼠海马神经元的轴突、细胞体和树突(5)。最初认为抗tau-1抗体的特异性代表了tau对轴突的限制性表达。后来的研究表明，这种特异性取决于磷酸化的状态。在去磷酸化的样品(用碱性磷酸酶处理的样品)中，抗tau-1抗体可对星形胶质细胞、神经胶质细胞和神经元的轴突、细胞体和树突进行染色，而在未处理的样品中，抗tau-1抗仅会染色轴突(6)。(抗tau-1抗体识别的表位可能位于磷酸化位点或附近。)

特异性

可与人、大鼠和牛脑中各种已知tau电泳形式结合(一维SDS-PAGE)。然而，克隆PC1C6存在一些未磷酸化的偏差，原因是其似乎只能识别195、198、199和202处的去磷酸丝氨酸位点(Szendrei等，1993； http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi-cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=7680727)。另请参阅Billingsley & Kincaid, 1997 Biochem J 323:577-591中有关PC1C6的其他信息。

免疫原

纯化的变性牛微管相关蛋白。

应用

研究类别
神经科学
抗Tau-1抗体，克隆PC1C6，是一种抗Tau-1的抗体，可用于IH和&WB，其已有超过65次产品引用。
研究子类别
神经退行性疾病
蛋白质印迹：牛脑微管蛋白通过两个组装和拆卸循环(9)进行纯化，并溶解于SDS-PAGE样品缓冲液中。每个泳道将五微克微管样品沿着分子量标记(14.3-200 kD)一侧加上样至4％至20％SDS-PAGE梯度凝胶上。通过电泳分离后，将蛋白质印迹至硝酸纤维素上。利用大约5 ng/mL的抗tau1抗体，Tau被检测为一系列5条带(52-68 kD)。

免疫荧光：该抗体以1：1000的稀释度可在小鼠原代神经元中检测到Tau。(Basnet, N., et al. (2018).Nat. Cell Biol. 20(10); 1172-1180.

免疫组织化学: 5 μg/mL；在组织中主要染色轴突，但是在培养物中Tau的表达不仅限于轴突。

最佳工作稀释度必须由最终用户确定。

免疫组织化学实验方案

组织切片的去磷酸化(可选)

建议使用碱性磷酸酶去磷酸化以通过抗tau-1抗体对阿尔茨海默症′脑组织中神经原纤维缠结进行染色含有(6)。这种处理方法改变了抗tau-1抗体的染色模式，使其可染色包括神经元的细胞体、树突和轴突。在未经处理的样品中，抗tau-1抗仅可对轴突染色。

1.以+32°C孵育组织切片2.5小时，并在以下溶液中不断搅拌：100 mM Tris-HCl(pH 8.0)；130单位/mL碱性磷酸酶、1 mM PMSF、10 μg/mL胃抑素和10 μg/mL亮肽素。

2.使用100 mM Tris-HCl(pH 8.0)洗涤切片两次，每次洗涤3分钟。

抗tau-1抗体染色

1.在含有1％(v/v)正常动物血清和0.03％(w/v)Triton X-100的PBS中孵育切片，以阻断非特异性结合。动物血清应与二抗来自同一物种。

2.用PBS洗涤3次，每次洗涤3分钟。

3.用约5 μg/mL的抗tau-1抗体孵育切片，并在含1％(v/v)正常动物血清的PBS中进行稀释。

4.用PBS洗涤，在3分钟内更换溶液3次。

5.使用标准的二抗检测系统进行含量(10-13)。

目标描述

5条带(52–68 kDa)

联系

替代品：AB1512

外形

形式：纯化
纯化的蛋白 A
0.02M磷酸盐缓冲液(pH 7.6)、0.25M NaCl和0.1％叠氮化钠

储存及稳定性

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。避免反复冻融。为了最大程度地回收产品，在融化后和取下盖子之前，将原始样品瓶进行离心。

分析说明

对照
阿尔兹海默症′脑组织(建议在碱性磷酸酶中进行去磷酸化以对阿尔茨海默症’脑组织中的神经原纤维缠结进行染色)或人T98G胶质母细胞瘤细胞

其他说明

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

法律信息

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免责声明

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明，否则我们的产品仅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

基本信息

产品性质

安全信息