产品说明
一般描述
尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UNG)含有在原核生物和真核生物中发现的同名酶的高活性重组形式。它水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键,切除尿嘧啶,并在 DNA 中产生碱敏感的脱碱基位点。核酸内切酶、加热或碱处理可水解这些脱碱基位点。根据 DNA 的制备方式,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于实现一般的、位点特异性的或链特异性的 U-DNA 切割。
特异性
- 尿嘧啶-DNA 糖基化酶水解单链和双链 DNA 中 U-DNA 位点的尿嘧啶糖苷键,切除尿嘧啶,并在 DNA 中形成碱敏感的脱碱基位点。
- 该酶对单链 DNA 的活性高于双链 DNA。
- 对小 U-DNA 寡核苷酸和 dUMP 也具有活性(Duncan,未发表的研究结果)。
- 尿嘧啶-DNA 糖基化酶对 RNA 和天然的无尿嘧啶 DNA 无活性。
热灭活:95℃,10 分钟
尿嘧啶-DNA 糖基化酶在 95℃ 温育 30 分钟后保持部分活性(<10%)。
应用
尿嘧啶-DNA 糖基化酶可用于在已掺入脱氧尿苷酸残基的任何位点切割 DNA。U-DNA 可以通过体外方法(如 PCR)制备。根据 DNA 的制备方式,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以实现一般的、位点特异性的或链特异性切割。因此,尿嘧啶-DNA 糖基化酶可以帮助您:
- 预防 PCR 中的携带污染
- 提高定点突变实验的效率
- 标记寡核苷酸探针
质量
通过在扩增反应之前,添加约 105dU(含有模板) 来检测携带预防活性。UNG 处理后,检测不到扩增产物。该酶不含任何污染的外切或内切核酸酶,并且经检测不含 RNA 酶。
单位定义
一个单位的尿嘧啶-DNA 糖基化酶是在 +37℃ 下,在 60 分钟内能够完全降解 1 μg 纯化的含有尿嘧啶的单链 DNA(噬菌体 M13,生长在 大肠杆菌 CJ 236 dut-ung- 中)所需的酶量。
一个 Lindahl 单位的酶是指在 +37℃ 下,在 1 分钟内能释放 1 μmol 尿嘧啶所需的酶量。根据我们的单位定义,一个 Lindahl 单位对应于 520,000 U。
体积活动:1 U/μl
外形
提供 1U/μl 的该酶,溶于储存缓冲液。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
产品性质
质量水平 | 100 |
形式 | solution |
包装 | pkg of 100 U |
manufacturer/tradename | Roche |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | No data available |
闪点(C) | No data available |