产品说明

一般描述

热启动协议已被证明能显著提高PCR的特异性、灵敏度和产量。快速启动Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的不耐热保护基使修饰酶在室温下无活性。因此，在引物可以非特异性结合的时期没有延伸。快速启动Taq DNA聚合酶通过在高温条件下除去保护基来激活(即+95℃条件下的预保温步骤)。
FastStart TaqMan^®探针预混液是不含ROX染料的即用型热启动反应混合物，用于在实时PCR系统(LightCycler^®仪器除外)上进行定量聚合酶链式反应(qPCR)和逆转录(RT)-qPCR。它是包含所有反应所需试剂(引物、探针和模板除外)的2x浓缩预混液。预混液简化了DNA检测和分析反应的试剂制备。可灵敏检测和定量特定DNA序列。
热启动实验方案经证还可大幅提升特异性及PCR得率。在FastStart Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的热不稳定性封闭基团使得改造过的酶在室温下失活。因此，在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart Taq DNA聚合酶可在高温(如在+95℃的预孵育步骤)下通过将封闭基团去除而被激活。
FastStart TaqMan^®探针预混液可用于任何DNA或cDNA靶标的扩增和检测，包括高GC或AT含量序列。不过用户需根据待用的实时PCR仪的反应条件调整检测方案，并针对各目标序列设计特定的水解探针和PCR引物。
将预混液与我们的Transcriptor第一链cDNA合成试剂盒结合以在两步法qRT-PCR中获得优异结果。

应用

FastStart TaqMan^®探针预混液已用于：

• 实时定量DNA检测
• qPCR和2步法逆转录(RT)-qPCR
• 水解探针应用

特点和优势

• 提高 qPCR 灵敏度和特异性：

热启动酶 FastStart Taq DNA 聚合酶和主混合物中包含的最高纯度核苷酸产生较低的循环阈值 (C _t )。

• 用于任何基于探针的检测：

使用通用探针库探针或任何其他水解探针的检测中获得灵敏、特异结果。

• 扩增和检测广泛的DNA或cDNA靶：

扩增长度高达500 bp的片段，包括那些富含GC或AT的片段。

• 使用除 LightCycler^®仪器以外的任何实时 qPCR 仪器：

从两种制剂中选择——一种含有 ROX 引用染料，另一种不含 ROX。

• 在琼脂糖凝胶上显示扩增产物。

• 使用机器人移液站设置 qPCR 反应：

受益于延长反应设置时间期间在室温下稳定的预混液。

• 防止携带污染：

混合物中含有 dUTP，因此可与尿嘧啶-DNA 糖基化酶配合使用，以防止携带污染(，即 ，扩增 DNA 污染)引起的假阳性。

组分

FastStart TaqMan ^® Probe Master，含 FastStart Taq DNA 聚合酶、反应缓冲液和核苷酸 (dATP、dCTP、dGTP、dUTP) 的 2 倍浓缩预混液。

质量

功能测试：每个批次都采用三种类型模板对在qPCR中的性能进行测试：高GC模板、高AT模板及长片段模板(约440 bp)。

其他说明

qPCR 靶标
原则上，FastStart TaqMan ^® Probe Master 可用于任何 DNA 或 cDNA 靶标的扩增和检测，包括富含 GC 或 AT 的靶标。但是，对于每个靶标，您需要：

• 使检测方案适应实时 PCR 仪的反应条件，
• 为靶标设计特异性 PCR 引物和水解探针。

通用建议参见您的实时 PCR 仪的操作手册。
两种可用形式
，主混合物有两种可用形式-一种含有 ROX 引用染料，另一种不含 ROX。
防止携带污染
本主机包含 dUTP，dUTP 将加入 PCR 产品中，以帮助防止携带污染导致的假阳性。在随后的 PCR 中，您可以加入尿嘧啶-DNA 糖基化酶来降解任何含尿嘧啶的残留污染物(来自之前 PCR 的扩增产物)。
qRT-PCR
将此主混合物与我们的 Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit 结合，进行两步 qRT-PCR。该试剂盒提供极好的结果，与所有实时 PCR 仪器一起高效工作。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

产品性质

质量水平	100
用途	sufficient for 100 reactions sufficient for 2000 reactions sufficient for 500 reactions
特点	dNTPs included: no hotstart
manufacturer/tradename	Roche
包装	pkg of 100 x 50 μL reactions (04673409001) pkg of 2000 x 50 μL reactions (04673433001) pkg of 500 x 50 μL reactions (04673417001)
technique(s)	RT-qPCR: suitable qPCR: suitable
input	purified DNA
detection method	probe-based

安全信息

储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash