产品说明
一般描述
Sigma 的 DNA 连接试剂盒包含进行 DNA 连接反应所需的所有试剂。粘性末端连接比平末端连接更有效。加入 PEG 可促进这些反应。
应用
适用于:
- 将 DNA 片段连接到克隆载体中
- 诱变
- 基因分析与结构功能关系
组分
足以进行 150 次反应:
- 在 250 mM Tris-HCl(pH 7.8),100 mM MgCl2 和 10 mM 二硫苏糖醇中的 300uL 10X 连接缓冲液(D2176)
- 含有 3 x 100 单位 T4 DNA 连接酶(D2886),10 mM Tris-HCl,pH 7.5,50 mM KCl 和 1 mM 二硫苏糖醇的 50% 甘油溶液
- 3 x 100 uL 10 mM ATP(A3702)
- 50μL 对照 pBR322 DNA,HAE III Digest(D9430)浓度为 0.5 ug/ul,溶于 10 mM Tris-HCl(pH 8.0)和 1 mM EDTA 中
- 1.5 mL 24%(w/v)PEG 溶液,(P 2454)
- 1.5 mL 分子生物学级水(W4502)
原理
克隆过程中最重要的步骤之一是将线性 DNA 连接到克隆载体中。在缓冲液、ATP 和 DNA 连接酶的存在下,通过将 DNA 片段与适当线性化的克隆载体孵育可进行 DNA 连接。插入物与载体的相对比例、DNA 末端的质量和类型、连接温度和 DNA 浓度等多种参数会影响连接。
基本信息
NACRES | NA.53 |
产品性质
质量水平 | 200 |
等级 | for molecular biology |
用途 | 1 kit sufficient for 150 ligation reactions |
运输 | wet ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Warning |
危险声明 | H319 |
预防措施声明 | P264 - P280 - P305 + P351 + P338 - P337 + P313 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 |
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |