产品说明

一般描述

在所有需要标准化ROX的实时PCR系统上用于qPCR和RT-qPCR的通用即用型热启动反应预混液。

FastStart^™ Universal SYBR Green Master (Rox)含有一种全新的参考染料，使其能够在所有需要标准化ROX的实时PCR仪器上使用，而无需对特定的仪器或方案进行修改或调整。这种即用型的2x浓度预混液含有以水解探针检测形式进行实时DNA检测量化分析所需的所有试剂，包括qPCR和两步法qRT-PCR。FastStart^™ Universal Probe Master (Rox)可在诸如Applied Biosystems 7900 HT Fast Real-Time PCR或Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR系统等仪器上生成理想的结果。该产品不可用于LightCycler^®仪器。
结果表明，热启动方案可显著提高PCR的特异性、敏感性和产量。在FastStart ^™Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的不耐热保护基使得钝化酶在室温下失去活性。因此，在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart^™ Taq DNA聚合酶可在高温(如在+95℃的预培养步骤)下通过去除保护基去而予以激活。

应用

使用FastStart^™通用探针预混液(Rox)：

• 用于TaqMan^®实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)，以量化内源性miRNA，例如MIR376B、MIR376A和MIR181A
• 用于逆转录酶(RT-PCR)，以研究肿瘤坏死因子(TNF)在未分化外周炎性关节炎(UPIA)患者整个滑膜组织中的表达
• 用于任何DNA或cDNA靶标的扩增和检测，包括通过量化PCR富含GC或AT的。

将预混液与Transcriptor First Strand cDNA合成试剂盒(Roche)结合以在两步法qRT-PCR中实现极佳的结果。

特点和优势

• 提高qPCR的灵敏度和特异性。

产生较低的循环阈值(Ct)。

• 将主混合物用于任何基于探针的检测。

使用通用探针库探针或任何其他水解探针的检测中获得灵敏、特异结果。

• 扩增和检测广泛的DNA或cDNA靶。

扩增长度高达500 bp的片段，包括那些富含GC或AT的片段。

• 可视化琼脂糖凝胶上的扩增产物。

• 使用机器人移液站来设置qPCR反应。

在延长的反应设置时间内，使用在室温下稳定的主混合物。

• 防止遗留污染导致的误报。

结合使用这种含dUTP的混合物和尿嘧啶-DNA糖基化酶，消除以前PCR反应中遗留下来的污染性DNA。

组分

快速启动通用探针主机(Rox)，2倍浓缩主混合物，包含快速启动Taq DNA聚合酶、反应缓冲液、核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dUTP)和参考染料。

质量

功能测试：使用三个模板对每批样本进行qPCR性能测试，即富含GC的模板、富含AT的模板和长模板(约440 bp)。

其他说明

仅用于生命科学研究。不用于诊断操作

法律信息

FastStart is a trademark of Roche
LightCycler is a registered trademark of Roche
TaqMan is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

产品性质

质量水平	100
用途	sufficient for 1250 reactions sufficient for 250 reactions sufficient for 5000 reactions
特点	dNTPs included: no hotstart
manufacturer/tradename	Roche
包装	pkg of 1250 x 20 μL reactions (04913957001) pkg of 250 x 20 μL reactions (04913949001) pkg of 5000 x 20 μL reactions (04914058001)
technique(s)	RT-qPCR: suitable qPCR: suitable
input	purified DNA
detection method	probe-based

安全信息

储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash