产品说明
一般描述
KAPA2G FAST DNA聚合酶是专为提高产率和速度而设计的第二代(2G)酶,与野生型Taq 聚合酶相比,其延伸速率更快。 除速度外,KAPA2G Fast在大量的靶标中比竞争对手的酶具有更高的产量和灵敏度。
KAPA2G Fast ReadyMix™ PCR试剂盒专为快速PCR而设计,其总反应时间相比使用野生型 Taq DNA 聚合酶进行的常规PCR分析快20–70%。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现,并且不需要专门的PCR耗材或热循环仪。
应用
KAPA2G Fast ReadyMix™已被用于:
- 巢式PCR(nPCR)
- 常规PCR
- 快速PCR
- 基因分型
生化/生理作用
以KAPA2G Fast DNA Polymerase生成的DNA片段可用于常规下游分析或应用,包括限制性内切酶消化、克隆和测序。KAPA2G Fast的保真度和野生型Taq类似;其错误率为每1.7 x 105个核苷酸大约1次错误。和野生型 Taq相似,KAPA2G Fast具有5→3′聚合酶和 5′→3′核酸外切酶活性,但是没有3′→5′核酸外切酶 (校对) 活性。
特点和优势
将循环时间至多缩短75%:
- 延伸时间低至每千碱基1秒
- 覆盖范围广泛,富含AT和GC的靶
高速、高性能:
- 复杂靶的单拷贝灵敏度
- 产量增加
临时速记:
- KAPA2G快速预混PCR试剂盒包含为快速PCR开发的工程化KAPA2G快速DNA聚合酶。
- 对于< kb的扩增子使用1秒的延长时间,对于更长的扩增子使用15 sec/kb的延长时间,节省总反应时间的20–70%。
- 不需要专门的仪器或PCR消耗品。
- 优化的缓冲体系提高了产量、特异性和灵敏度,有助于在各种引物长度、GC含量和熔化温度下进行有效的引物筛选。
- 为了实现高反应效率,不要超过25 μL反应体积。
- 1X KAPA2G快速预混物含有1.5 mM MgCl2。KAPA2G快速预混物包含两种惰性跟踪染料,可直接加载到琼脂糖凝胶上。
- 反应产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。
质量
每批KAPA2G快速DNA聚合酶均被证实含有<2%的污染蛋白(Agilent蛋白质230分析)。KAPA2G快速预混物经过严格的质量控制测试,不含污染性的外切和内切核酸酶活性,符合关于DNA污染水平的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果预混物经过小心处理且未被污染,试剂盒不小心在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不可用于诊断操作。
法律信息
ReadyMix is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
NACRES | NA.55 |
产品性质
质量水平 | 100 |
用途 | sufficient for 100 reactions sufficient for 2000 reactions sufficient for 500 reactions |
保质期 | ≤18 mo. |
特点 | Fast PCR dNTPs included hotstart: no |
包装 | kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5101) kit of 25 mL (KK5103) kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5102) |
manufacturer/tradename | Roche |
浓度 | 2 × |
technique(s) | PCR: suitable |
input | purified DNA |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
KAPA2G Fast HotStart® DNA Polymerase 0.5 U per 25 µL reaction | |
MgCl2 1.5mM at 1X | |
Stabilizers | |
dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Warning |
危险声明 | H371 |
预防措施声明 | P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501 |
危险分类 | STOT SE 2 |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |