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KAPA2G Robust HotStart PCR Kit

KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒

品牌
Roche
货号
2GRHSNTKB
规格纯度
with dNTPs
参考价格
720.92 *本价格含增值税费
促销
数量
-+
产品介绍:

产品说明

一般描述

第二代KAPA2G Robust DNA聚合酶可用于解决多种扩增子类型(GC- 和AT-rich)的不一致扩增问题。该产品实现了更高的持续性和特异性活性,这意味着稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的更高耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合挑战性 PCR 应用和样本,避免了使用多种酶和方案进行优化。

应用

KAPA2G Robust HotStart® PCR 试剂盒已用于:

  • 扩增富含 GC 或 AT 的模板
  • 含有常见 PCR 抑制剂(例如,盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
  • 粗制样本 PCR,例如口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
  • 菌落 PCR
  • qPCR
  • 嵌套聚合酶链式反应(PCR)扩增
  • PCR 内 DNA 靶标的扩增
  • 使用传统 PCR 进行 DNA 扩增
  • 常规PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust HotStart® DNA 聚合酶生成的 DNA 片段与野生型 Taq DNA 聚合酶生成的 DNA 片段具有相同的特征。它可用于常规下游应用,如限制性内切酶消化、克隆和测序。和野生型 Taq 一样,KAPA2G Robust HotStart 具有 5′→3′聚合酶和 5'→3′ 核酸外切酶活性,但是没有 3'→5′ 核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Robust HotStart 的精确性与野生型Taq相近。错配率约为每结合 1.7 x 105 个核甘酸错配 1 次。

特点和优势

有效扩增富含 GC 和 AT 的靶标

  • 强力扩增富含 GC 和 AT 的模板
  • 提高 PCR 成功率

改善对常见 PCR 抑制剂的耐受性
  • 从粗样本中有效扩增
  • 每单位酶的产率和灵敏度更高

在菌落 PCR 中具有无与伦比的性能
  • 大肠杆菌和酵母细胞直接 PCR 中具有更高的产量和更好的一致性

快速注释:
  • KAPA2G Robust HotStart® PCR 试剂盒(含 dNTP)含有 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶,专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
  • 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
  • 每 25 μL 或更低体积的反应使用 0.5 U KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶。更具挑战性的 PCR(富含 GC,粗制样本)可能需要更高的酶浓度。
  • 每个循环的延伸时间设置为 15 sec/kb,对于困难扩增子或模板,增加到 30-60 sec/kb。
  • 含有1.5mM MgCl2 的 KAPA2G 缓冲液(1X)。
  • 可以使用试剂盒中提供的 25mM MgCl2 溶液额外添加 MgCl2
  • KAPA2G 缓冲液 A 经过优化,具有高产量、特异性和灵敏度。
  • KAPA2G 缓冲液 B 推荐用于抑制剂污染的模板样品。
  • KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR(>70% GC)。
  • KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用,特别适用于富含 GC 的 PCR 试验。
  • 反应产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。

质量

每批次 KAPA2G Robust HotStart® DNA 聚合酶均已确认含有 <2% 的污染蛋白(Agilent Protein 230 分析)。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试,没有污染外源和内切酶活性,符合 DNA 污染水平的严格要求。

制备说明

在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存 4℃ 条件下(最长 1 个月)。长期储存时,应将试剂放回 -20℃ 环境中。如果所有组份在使用过程中非常仔细,没有受到污染,则试剂盒在短时间内(最多 3 天)被放置在室温下(无意中)预计不会失效。不建议在室温和 4℃ 下长期储存。请注意,在 -20℃ 以上的温度下储存的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在超过 -20℃ 的温度下储存的风险由用户自己承担。

其他说明

仅供研究使用。不可用于诊断操作。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

基本信息

NACRESNA.55

产品性质

质量水平100
用途 sufficient for 1000 reactions
sufficient for 200 reactions
sufficient for 500 reactions
保质期≤12 mo.
特点Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包装pkg of 100 U (KK5532)
pkg of 250 U (KK5516)
pkg of 500 U (KK5518)
manufacturer/tradenameRoche
technique(s)PCR: suitable
input crude DNA
运输dry ice
储存温度−20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号组份
KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 5 U/µL
5X KAPA2G Buffer A
5X KAPA2G Buffer B
5X KAPA2G GC Buffer
5X KAPA Enhancer 1
KAPA MgCl2 25 mM
KAPA dNTP Mix 10 mM each

安全信息

象形图GHS07GHS08
警示用语:Warning
危险声明H302 - H371 - H412
预防措施声明P260 - P264 - P270 - P273 - P308 + P311 - P501
危险分类Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
储存分类代码12 - Non Combustible Liquids
WGKWGK 1
闪点(F)does not flash
闪点(C)does not flash

Sigma-Aldrich

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