产品说明
一般描述
KAPA SYBR快速一步法qRT-PCR 试剂盒专为严格 qRT-PCR 反应条件下的最佳性能而设计，在灵敏度、特异性、反应效率和荧光方面都有巨大提升。试剂盒经过优化，可进行快速的一步法、单管 RNA 定量，以便捷的 qRT-PCR 方案减少实验变异和污染。
KAPA SYBR快速一步法qRT-PCR 试剂盒含有 M-MuLV 逆转录酶、RNase 抑制剂和一种通过定向进化获得的新型 DNA 聚合酶。
应用
KAPA SYBR® FAST 一步法
- 基因表达分析
- 低拷贝基因检测
- 微阵列验证miRNA研究
- 基因敲除验证
- 实时定量逆转录-PCR (qRT-PCR)
- RNAi和miRNA研究
特点和优势
提高信号传导和反应效率
- 精确 qPCR 的扩增效率始终较高。
- 更高荧光，更早 Cq 值，以及更高反应效率。
在广泛的目标长度范围内扩增
- 与扩增子大小无关的稳健性能。
- 提高灵敏度和重现性
- 在广泛的 RNA 模板浓度范围内进行准确询问。
临时速记：
- 该试剂盒包含野生型 M-MuLV 和使用 SYBR Green I 染料化学优化 qPCR 的工程酶。
- 2X 预混液含有专有缓冲液。结合新型酶可提高富含 GC 和 AT 靶标的扩增效率。
- 只使用基因特异性引物进行一步法 qRT-PCR。
- 最佳的 cDNA 合成是在 42℃ 下反应5 分钟。
- 在95℃ 下反应3 分钟 足以使 RT 失活和 DNA 聚合酶活化。
- 对于 3 步循环，引物退火用 20秒，72℃ 下延伸/数据采集用 1 秒。
- 反应体积不得超过 25μL。
质量
所有试剂盒组分均经过严格的功能质量控制，无可检测的污染外切和核酸内切酶活性，并符合 DNA 污染方面的严格要求。
制备说明
总是确保所有的组份在使用用彻底溶解并充分混合。KAPA SYBR® FAST qPCR预混液(2X)可能不会冻结，即使储存于-20℃下。KAPA RT混合物对温度敏感，应储存在-20℃下，在冰面上使用。
KAPA SYBR FAST qPCR预混液(2X)和ROX/莹光染剂(取决于套件配置)内包含的SYBR Green I染料对光敏感。长时间暴露在直射光下会导致荧光信号强度下降。
KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) 经过30个冻融循环后仍稳定。当不使用时，确保所有试剂在-20℃的温度下避光储存。只要不被微生物和/或核酸酶污染，试剂可在4℃的避光环境中至少稳定保持一个星期，并可在这个温度下储存以供短期使用。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
法律信息
Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
QuantStudio is a trademark of IROA Technologies LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies
StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries
基本信息
| NACRES | NA.55 |
产品性质
| 质量水平 | 100 |
| 用途 | sufficient for 100 reactions sufficient for 1000 reactions sufficient for 500 reactions |
| 保质期 | ≤6 mo. |
| 特点 | dNTPs included: no hotstart: no |
| 包装 | kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4650) kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4652) kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4651) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| 浓度 | 2 × |
| technique(s) | RT-PCR: suitable qPCR: suitable |
| input | purified DNA |
| 相容性 | for use with Agilent Mx3000P for use with Agilent Mx3005P for use with Agilent Mx4000 for use with Applied Biosystems® 5700 for use with Applied Biosystems® 7000 for use with Applied Biosystems® 7300 for use with Applied Biosystems® 7500 for use with Applied Biosystems® 7700 for use with Applied Biosystems® 7900HT for use with Applied Biosystems® ViiA 7 for use with QuantStudio™ for use with StepOne™ for use with StepOnePlus™ |
| detection method | SYBR® Green |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
| 货号 | 组份 |
| KAPA RT Mix | |
| dUTP | |
| KAPA SYBR® FAST DNA Polymerase | |
| reaction buffer | |
| dNTPs | |
| SYBR® Green I dye | |
| MgCl2 2.5 mM |
安全信息
| 象形图 |  |
| 警示用语： | Warning |
| 危险声明 | H371 |
| 预防措施声明 | P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501 |
| 危险分类 | STOT SE 2 |
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | does not flash |
| 闪点(C) | does not flash |
