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红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)
产品介绍

红细胞(Red blood cell,RBC)也称红血球,是血液中数量最多的一种血细胞,脊椎动物体内通过RBC运送氧气,RBC同时还具有免疫功能。在贫血检查中,可通过红细胞渗透脆性试验来检测红细胞膜的缺陷。

尚宝生物红细胞孵育渗透脆性检测试剂盒(比色法)(Erythrocyte Incubated Osmotic Fragility Assay Kit )检测原理是将患者血液置于37℃孵育24h,使红细胞代谢继续进行,由于葡萄糖的消耗,储备的ATP减少,导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻,造成钠离子在红细胞内聚集,细胞膨胀,孵育渗透脆性增加,某些有细胞膜缺陷以及某些酶缺陷的红细胞的葡萄糖和ATP很快被耗尽时,孵育渗透脆性明显增加,该实验被称为红细胞孵育渗透脆性试验。该试剂盒主要用于检测人、动物血液的红细胞孵育渗透脆性,并计算红细胞中性脆性(MCF)。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

产品名称规格保存条件
试剂(A): NaCl pHospHate buffer100ml2-8℃
试剂(B): ddH2O100ml室温

自备材料:

1.小试管

2.比色杯

3.分光光度计

操作说明:

1.取肝素抗凝血2ml,分成2份,1份立即实验,另1份密闭37℃孵育24h后再作实验。

2.取小试管或恰当容器,依次,按照下表稀释成不同浓度。每次检查应设正常对照。

试管号12345678910111213
试剂A(ml)3.43.02.82.62.42.22.01.81.61.41.20.80.4
试剂B(ml)0.611.21.41.61.82.02.22.42.62.83.23.6
NaCl浓度(g/L)8.57.57.06.56.05.55.04.54.03.53.02.01.0

3.分别吸取40μl肝素抗凝血加入上述NaCl稀释液中,轻轻混匀,室温(20℃)静置30min。

4.将各管再次混匀1次,离心沉淀5min,取上清液。

5.用分光光度计检测540nm波长,以NaCl pHospHate buffer作为空白管调零,测定各溶血管的吸光度。

6.计算溶血百分率:以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度为100%,计算相应氯化钠浓度的溶血百分率。溶血百分率(%)=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100

7.计算红细胞中性脆性(MCF):以溶血百分率为纵坐标,以氯化钠浓度为横坐标,作溶血曲线图,即为红细胞盐水渗透脆性曲线。在曲线上,50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中性脆性(MCF)。

参考区间:

未孵育,50%溶血氯化钠浓度         4.00~4.45g/L

37℃孵育24h,50%溶血氯化钠浓度    4.46~5,9g/L

注意事项:

1.每次检查应设正常对照。

2.NaCl pHospHate buffer pH值及温度必须恒定,pH改变0.1或温度改变5%,均可使结果偏差0.01%。

3.NaCl pHospHate buffer采用高纯度氯化钠配制,普通氯化钠不宜采用。

4.NaCl pHospHate buffer不要被酸碱污染,同时注意密闭保存。

5.血液样品应直接滴入液体,不宜沿管壁流入。

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:12个月有效。

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