R1/E小鼠胚胎干细胞

产品介绍

目录号 Serial	SCSP-201
标识符 Identifier	CSTR:19375.09.3101MOUSCSP201
描述 Description	1991年8月，德国海德堡的欧洲分子生物学实验室(EMBL)Kristina Vintersten用129X1×129S1品系的3.5天囊胚成功建立R1细胞，R1/E细胞是R1的亚克隆。该细胞系已被证明具有生殖能力，其中F1代毛色为单一的鼠灰色，F2代两个毛色基因分离。这种分离可能导致产生白色、浅棕色、黑色等几种毛色，这取决于生殖系嵌合体亲本的遗传背景。R1的多能性最初通过四倍体胚胎检测，当然也可以用二倍体胚胎检测。然而，当进行四倍体聚集体检测时，来自第14代的约20%的亚克隆具有R1的原始发育潜能。R1衍生的动物成年后可育。将经过基因改造的R1细胞注射到C57囊胚中或将其与CD-1或远交系ICR 8细胞期胚胎聚集，可以产生高效的生殖系传递。90%以上敲除克隆通过聚集嵌合体进入生殖系(n> 60)。每个批次均通过本库支原体检测，结果为阴性。培养时需使用昆明白MEF(SCSP-101R)作为饲养层细胞。
动物种别 Organism	小鼠，129X1×129S1品系
性别 Gender	雄性
组织来源 Tissue and Cell Type	小鼠3.5 dpc胚胎内细胞团
形态 Morphology	球形克隆，贴壁生长
培养基和添加剂 Complete Growth Medium and Culture Conditions	mES完全培养液配方(600 ml)： DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES级FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(终浓度为1000U/ml) β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
供应限制 Permits and Restrictions	A。仅供研究之用。
REFERENCE	Matise M, et al., Production of targeted embryonic stem cell clones. In: Matise M, et al., Gene Targeting: A Practical Approach. Oxford, Oxford University Press, 101-132, 1999Nagy A, et al. Derivation of completely cell culture-derived mice from early-passage embryonic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA : 8424-8428, 1993. PubMed: 8378314Wood SA, et al. Non-injection methods for the production of embryonic stem cell-embryo chimaeras. Nature 365: 87-89, 1993. PubMed: 8361547Nagy A, Rossant JProduction and analysis of ES-cell aggregation chimeras. In: Nagy A, Rossant J. Gene Targeting: A Practical Approach. Oxford, Oxford University Press, 177-206, 1999

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