限制性内切酶PmeI

• 符合省时酶（Time-Saver™ ）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 CutSmart^® 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：GTTT/AAAC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有来自门多萨假单胞菌（Pseudomonas mendocina）（B. Zhou）的 PmeI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，在 37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: <10%
  NEBuffer™ r2.1: 50%
  NEBuffer™ r3.1: 10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  同裂酶

  MssI
  

• 注意事项
  1. 该内切酶在切割某些超螺旋质粒时活性较低，酶切 1 ug 质粒 DNA 需要超过 1 个单位的酶量。如需完全酶切 1 ug 质粒 DNA，请采用我们推荐的酶切方案。
  2. 因为反应中酶的稳定性，即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率，除非增加酶量。如需了解更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
  3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。