限制性内切酶HpyCH4III

• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 酶切位点 ACN/GT

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）CH4（S.A. Thompson）的 HpyCH4III 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，在 37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 100%
  NEBuffer™ r2.1: 25%
  NEBuffer™ r3.1: <10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  Bst4CI
  TaaI
  Tsp4CI+
  

• 注意事项
  1. Bst4CI 是 HpyCH4III 的同裂酶。
  2. HpyCH4III 切割产生的 DNA 片段含有难以连接的单碱基 3´ 突出末端。
  3. 建议消化每 µg DNA 的酶量不 > 5.0 units，温育时间不 > 4 小时。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。