限制性内切酶AciI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切

• 限制性内切酶酶切位点：CCGC(-3/-1)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自节杆菌（Arthrobacter citreus）（C. Polisson）的 AciI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 μg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1:<10%
  NEBuffer™ r2.1: 25%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 μg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4                 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam  甲基化: 不敏感                        
  dcm 甲基化: 不敏感                        
  CpG甲基化: 阻断酶切

  同裂酶

  BspACI
  SsiI
  

• 稀释液 A

• 注意事项

1. AciI 的识别位点是非回文序列。因此在 DNA 被 AciI 酶切并再连时，只有 50% 的再连序列产生 AciI 的识别位点。

2. 温育时间超过 1 小时不会提高此酶的酶切效率。如需了解更多信息，请访问“限制性内切酶在反应中的活性”。

3. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。

4. CpG 甲基化阻断酶切。