限制性内切酶AccI

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切

• 限制性内切酶酶切位点：GT/MKAC

产品来源

大肠杆菌菌株，携带来自醋酸钙不动杆菌（Acinetobacter calcoaceticus）（R. Roberts）的 AccI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 μg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 50%
  NEBuffer™ r2.1: 50%
  NEBuffer™ r3.1: 10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 μg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4                 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam  甲基化: 不敏感                        
  dcm 甲基化: 不敏感                        
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

  同裂酶

  FblI
  XmiI
  

• 稀释液 A

• 注意事项

1. 在 M13 和 pUC 克隆载体上的 polylinker 中含单个 AccI 酶切位点。

2. AccI 要求在其识别序列外至少有 13 个保护碱基对，才能进行有效切割。

3. 该酶在切割某些超螺旋质粒时活性较低，酶切 1 μg 质粒 DNA 需要超过 1 个单位的酶量。如需完全酶切 1 μg 质粒 DNA，请采用我们推荐的酶切方案。

4. CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。