产品说明
一般描述
转染操作可将小干扰RNA(siRNA)直接递送至细胞中。X-tremeGENE siRNA转染试剂是一种脂质体转染试剂,为向动物细胞中递送siRNA提供了一种方便、可靠和高效的途径,便于用户进行基因敲除后的细胞及功能学研究。
这一创新型试剂能够与siRNA以及siRNA和质粒的混合物(共转染的情况下)形成复合物,并有效递送这些核酸进入细胞,以介导基因沉默。只需简单的几步就可完成转染:首先将转染试剂与稀释过的siRNA混合并孵育,之后将复合物直接加入细胞培养物中。由于X-tremeGENE siRNA转染试剂在有无血清的条件下均工作良好,且经论证无明显细胞毒性,因此无需更换培养基。本品不含任何动物源性成份。
组分
本试剂经0.2 μm滤膜过滤,聚丙烯小管包装。
应用
X-tremeGENE siRNA 转染试剂能够有效将短干扰RNA(siRNAs)转入许多种常用细胞,包括HeLa,NIH 3T3,HEK-293,CHO-K1,和COS-7和一些难转染细胞系,比如HT29,一种人腺癌细胞系。
特点和优势
- 在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。
- 高灵活应用, 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。
- 细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。
- 兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。;
X-tremeGENE siRNA转染试剂是一款包含脂质体及其他组份的专利混合试剂,无动物源成分。
质量
活性分析:将X-tremeGENE siRNA转染试剂(1 - 2.5 μl)与特异性靶向HPRT看家基因的siRNA(0.1 - 0.35 μg)相互混合。在含10%胎牛血清(FBS)的条件下,将此混合物用于转染HEK-293细胞(生长密度为30-50%的单层细胞)。转染后通过LightCycler®实时荧光定量PCR来检测细胞中HPRT mRNA水平的降低情况。测得的mRNA数据显示,观察到的敲除效率通常处于70-95%。
细胞毒性分析:HEK-293细胞暴露于siRNA/X-tremeGENE siRNA试剂混合物中72小时,未对含有血清的培养基进行换液。之后通过WST-1细胞增殖试剂(Roche)分析细胞,以测试细胞毒性。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律信息
X-tremeGENE is a trademark of Roche
产品性质
质量水平 | 100 |
等级 | for molecular biology |
用途 | sufficient for 2,000 transfections (04476115001) sufficient for 400 transfections (04476093001) |
包装 | pkg of 1 mL (04476093001 [1 mg/ml]) pkg of 5 × 1 mL (04476115001 [5 x 1 mg/ml]) |
manufacturer/tradename | Roche |
浓度 | 1 mg/mL |
technique(s) | transfection: suitable |
运输 | wet ice |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | nwg |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |