产品说明

一般描述

TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA^PLUS试剂盒提供了一种使用非放射性技术进行高灵敏度光度酶免疫检测的端粒酶活性检测方法。TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA^PLUS设计用于对细胞培养物和其他生物研究样品的细胞提取物进行生命科学研究。TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA^PLUS使用单管反应混合物，类似于TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA，但也包含优化的内标和对照模板，使TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA^PLUS能够定量检测端粒酶反应产物的量。它采用端粒重复序列扩增法(TRAP)。

应用

TeloTAGGG端粒酶PCR ELISA^PLUS用于检测尿液中、头颈部鳞状细胞癌和肿瘤边缘组织的冷冻切片中的端粒酶活性。

特点和优势

• 即用型主混合物：该试剂盒包含所有必需化合物作为主混合物
• 可靠性：该试剂盒中包含阳性对照
• 特异性：使用杂交探针可确保对应用的端粒酶反应产物进行特异性检测
• 定量结果：该检测可对端粒酶水平进行半定量检测

包装

1个试剂盒包含16种组分。

产品规格

检测时间：大约7小时
检测范围：试剂盒的线性检测范围为10 - 2,000个细胞(在293细胞模型系统中)
样品材料：细胞培养物和生物研究样本
灵敏度：检测<10个细胞当量(在293细胞模型系统中)

原理

测检测原理可分为以下步骤：
步骤1：延伸/扩增
第一步，端粒酶将端粒重复序列(TTAGGG)添加到生物素标记的合成P1-TS引物的3′端。使用引物P1-TS和锚定引物P2，通过PCR对这些延伸产物以及包含在相同反应容器中的内标(IS)进行扩增。来源于第一步中端粒酶介导的延伸产物的PCR产物含有端粒酶特异性六核苷酸增量，而内标(IS)产生216-bp的PCR产物。
步骤2：ELISA检测
将PCR产物分成两等份，变性，分别与地高辛-(DIG)标记的检测探针杂交，所述探针分别对端粒重复序列(P3-T)和内标(IS)(P3-Std) 具有特异性。通过生物素标记将所得产物固定到涂有链霉亲和素的微孔板上。然后用地高辛抗体检测固定的扩增子，该抗体与辣根过氧化物酶(抗DIG-HRP)和灵敏的过氧化物酶底物TMB缀合。

制备说明

工作溶液：溶液10：洗涤缓冲液，1x
用高压灭菌的双蒸水(1:10)稀释适量的10x浓度的洗涤缓冲液(10号瓶)并充分混合。一次反应大约需要5 ml稀释的洗涤缓冲液。
在2至8℃可稳定1个月。

溶液11: Anti-DIG HRP，11号瓶储备溶液
用240 μl高压灭菌的双蒸水复溶冻干物。得到的抗体缀合物浓度为0.5 U/ml。
在2至8℃可稳定6个月。请勿冷冻！请勿添加叠氮化钠！

溶液11：抗DIG HRP，工作液
为了制备工作液，用缀合物稀释缓冲液(溶液12)稀释适量的复溶抗DIG-HRP(溶液11)至终浓度为10 mU/ml(例如200 μl抗体溶液和9.8 ml缀合物稀释缓冲液) 。
临用前现配。请勿存放。
储存条件(工作液)：洗涤缓冲液，1x：
在2至8℃可稳定1个月。
抗DIG HRP，储备溶液：
在2至8℃可稳定6个月。请勿冷冻。请勿添加叠氮化钠。
抗DIG HRP，工作液：
临用前现配。请勿存放。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

Geron公司授权制造。
TeloTAGGG is a trademark of Roche

产品性质

组份列表

组份不可单独销售

安全信息

象形图
警示用语：	Warning
危险声明	H290 - H317
预防措施声明	P261 - P280 - P333 + P313 - P362 + P364 - P390 - P501
危险分类	Met. Corr. 1 - Skin Sens. 1
储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 2
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash