产品说明
一般描述
PCR核心试剂盒为特定模板的常规PCR进行最高灵敏度和特异性优化提供了所需的全部试剂(聚合酶、缓冲液、dNTP等)。为方便起见,试剂盒中的每种试剂成分都是以单独的小瓶形式提供的。这使得用户能够轻松更改反应混合物中聚合酶、dNTP和MgCl2的量。最重要的是,该试剂盒可轻松优化Mg2+的浓度,而这是PCR中最关键的变量之一。
应用
原理
PCR是一种在体外对特定DNA序列进行酶法合成的方法。反应使用可杂交至互补链上待扩增DNA序列两侧的两条寡核苷酸引物。一系列涉及模板变性、引物退火以及DNA聚合酶介导的退火引物延伸的重复循环可造成特异性DNA片段的积累,而相应DNA片段的两端是由引物的5′-端所定义的。
由于在某个循环中合成的引物延伸产物可在下一个循环中用作模板,因此每个循环中目标DNA的拷贝数大约会增加一倍;因此,PCR的20个循环可产生约一百万个目标DNA的拷贝(220)。引物的延伸是由Taq DNA聚合酶所催化的,而Taq DNA聚合酶是一种从嗜热真细菌嗜热栖热菌BM分离的热稳定DNA聚合酶。
PCR核心试剂盒设计用于为基于Taq DNA聚合酶的所有基本PCR应用确定单独的PCR条件。可通过使用试剂盒附带的不含Mg的缓冲液对反应缓冲液中非标准的Mg浓度进行优化,以获得具有更好灵敏度和特异性的检测体系。
包装
1个试剂盒包含5个组分。
质量
每次批次都使用了λDNA进行了PCR检测。根据现行的质量控制程序,每批还需检测不含核酸外切酶和核酸内切酶,并检测切割活性。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
内容
- Taq DNA聚合酶, 250 U,5 U/μl于储存缓冲液中:20 mM Tris-HCl、100 mM 二硫苏糖醇、0.1 mM EDTA、0.5% Nonidet P40 (v/v)、0.5% Tween 20 (v/v)、50%甘油(v/v),pH 8.0 (+4℃)
- dNTP储备液,200 μl,含有dATP、dCTP、dGTP、dTTP个10 mM,在无菌双蒸水中,pH 7.0
- PCR反应缓冲液,10x 浓缩液,2 x 1 ml,100 mM Tris-HCl,15 mM MgCl2,500 mM KCl,pH 8.3 (+20℃)
- 25 mM MgCl2储备液,1 ml
- 不含有MgCl2的PCR反应缓冲液,10x 浓缩液,1 ml,100 mM Tris-HCl,500 mM KCl,pH 8.3 (+20℃)
法律信息
本产品的使用受到美国专利No. 6,127,155及其对应的境外专利声明保护。 购买本产品,即相当于依照境外的专利声明获得了一份受限制、不可转让的使用许可,即将此等数量的产品用于购买者内部的研究用途。 购买者无权使用任何其他专利权利要求,无权进行任何形式的商业服务,包括但不限于以收费或其他商业考虑的形式对购买者的活动结果进行报道,该产品没有明示或暗示地以禁止反言或其他任何方式,授予过任何知识产权许可。 本品仅供研究使用。如需用于Roche专利声明的人类和兽医诊断用途,需另外征得Roche许可。 Roche专利权利声明下的内部研究以及人类和兽医诊断用途以外的所有用途均需要Thermo Fisher Scientific的单独许可。关于从Roche购买许可证的更多信息可以通过联系Roche Molecular Systems,Inc.,4300 Hacienda Drive,Pleasanton,California 94588,USA或Roche Diagnostics GmbH,Sandhofer Strasse 116,68305 Mannheim,Germany以获得许可证。 有关从Thermo Fisher Scientific购买许可证的更多信息,请联系Thermo Fisher Scientific的许可部门 ,5791 Van Allen Way,Carlsbad,California 92008,USA。
产品性质
质量水平 | 100 |
用途 | sufficient for ≤100 reactions |
包装 | kit of 1 (5 components) |
manufacturer/tradename | Roche |
参数 | 72 ℃ optimum reaction temp. |
technique(s) | PCR: suitable |
最佳pH | ~9.0 (20 ℃) |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
Taq DNA Polymerase, in storage buffer 5 U/μl | |
dNTP Stock Solution | |
PCR Reaction Buffer | |
MgCl2 Stock Solution | |
PCR Reaction Buffer without MgCl2 |
安全信息
危险声明 | H412 |
预防措施声明 | P273 - P501 |
危险分类 | Aquatic Chronic 3 |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 2 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |