产品说明
一般描述
KAPA Taq DNA聚合酶是一种从嗜热细菌水生栖热菌中提取并在重组大肠杆菌中纯化的单亚基Taq DNA聚合酶。KAPA Taq ReadyMix™ (2X) 是一种即用型混合物,包括除引物和模板之外PCR反应所需的其他所有成分。KAPA Taq ReadyMix可以随配染料或者不配染料。带有染料的2X ReadyMix含有两种惰性跟踪染料,可将PCR产物直接加载到琼脂糖凝胶上进行分析,无需添加DNA加样溶液。KAPA Taq和KAPA Taq HotStart® DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶以及5→′3′外切酶活性,但不存在3′ → 5′外切酶(校正)活性。该酶的错误率为大约每结合2.2 x 105个核苷酸出现1次错误。在热启动配方中,KAPA Taq是与一种专有的抗体相结合的,能够使得酶失活直至第一个变性步骤,从而消除了假扩增产物并提高了反应效率和灵敏度。
应用
带染料的KAPA Taq ReadyMix™ 已被用于:
- 高通量 PCR
- 扩增低拷贝 DNA 模板
- 多重 PCR
- 复杂模板的特异性扩增
- RT-PCR
- 巢式 PCR (nPCR)
- 扩增间变性淋巴瘤激酶(ALK)的外显子组23。
- 聚合酶链式反应 (PCR)扩增
生化/生理作用
KAPA Taq DNA聚合酶具有 5′→3′ 聚合酶和 5′→3′ 核酸外切酶活性。它不会引发3′→5'核酸外切酶(校正)活性。该酶的错误率为大约每结合2.2 x 105个核苷酸出现1次错误。用KAPA Taq产生的PCR产物具有A尾结构,适合克隆到TA克隆载体中。
特点和优势
主要特点:
高性能:
- 提高的灵敏度、特异性和产量
- 新型缓冲液配方有助于特异性引物退火,从而提高特定产品的产率
临时速记:
- KAPA Taq ReadyMix™可以取代现有方案中的任何商用Taq DNA 聚合酶。考虑到配方的差异,可能需要优化退火温度。
- KAPA Taq PCR 系统适用于从基因组 DNA 扩增高达 3.5 kb 的片段,或从较不复杂的靶标扩增 5 kb 的片段。
- 2X KAPA Taq ReadyMix(含染料)包含两种惰性示踪染料,PCR 产物可直接用于琼脂糖凝胶电泳。
- KAPA Taq ReadyMixes 含有 1.5mM MgCl2 和 0.2mM 各种 dNTP(1X)。
质量
每批 KAPA Taq DNA 聚合酶经确认均含有 <2% 污染蛋白(Agilent Protein 230 Assay)。KAPA Taq ReadyMixes 经过严格的质量控制测试,无污染的外切和核酸内切酶活性,并且符合严格的 DNA 污染要求。
制备说明
处理:
使用前务必确保产品已完全解冻并混合。试剂可在 4℃ 保存,供短期使用(最长 1 个月)。放回-20℃ 长期保存。
其他说明
仅供研究使用。不可用于诊断过程。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
NACRES | NA.56 |
产品性质
质量水平 | 100 |
用途 | 50 μL sufficient for 250 reactions |
保质期 | ≤18 mo. |
特点 | dNTPs included hotstart: no |
包装 | pkg of 6.25 mL |
manufacturer/tradename | Roche |
浓度 | 2 × |
technique(s) | PCR: suitable |
input | purified DNA |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
KAPA Taq Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL | |
10X KAPA Taq Buffer A | |
10X KAPA Taq Buffer B | |
10X KAPA Buffer with loading dye | |
5X KAPA Taq HotStart® Buffer (HotStart® kits only) | |
MgCl2 25 mM | |
dNTP Mix (optional) 10 mM each | |
Stabilizers |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |