产品说明
一般描述
KAPA-Taq是以包含除引物和模板之外所有其他PCR所需成分的2X ReadyMix™形式进行提供的。仅需加入PCR级的水以补足至所需的反应体积。KAPA Taq缓冲液A(及带有染料的KAPA Taq缓冲液)属于标准的Tris-硫酸铵基缓冲液，而KAPA Taq缓冲液B则是一种Tris-氯化钾缓冲液，使其能够在扩增循环完成后便捷地通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物直接进行分析。所有的KAPA Taq缓冲液都是10X的缓冲液，含有15 mM MgCl2(1.5 mM的1X)。KAPA Taq DNA聚合酶可结合任何pH 8.3或更高的标准Taq缓冲液进行使用。
应用
KAPA Taq PCR 试剂盒(含 dNTP)已被用于：
- 高通量 PCR
- 扩增低拷贝 DNA 模板
- 多重 PCR
- 复杂模板的特异性扩增
- RT-PCR
- 定量聚合酶链式反应(qPCR)
生化/生理作用
KAPA Taq DNA聚合酶是基于嗜热细菌水生嗜热杆菌的一种单亚基野生型Taq DNA聚合酶。KAPA Taq和KAPA Taq HotStart® DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶以及5′→3′外切酶活性，但不存在3′ → 5′外切酶(校正)活性。该酶的错误率为大约每结合2.2 x 105个核苷酸出现1次错误。在热启动配方中，KAPA Taq是与一种专有的抗体相结合的，能够使得酶失活直至第一个变性步骤，从而消除了假扩增产物并提高了反应效率和灵敏度。
特点和优势
优越性能
- 提高了灵敏度、特异性和产量。
- 新的缓冲液配方有利于特异性引物退火，带来特定产物的更高产量。
临时速记：
- KAPA Taq HotStart® DNA 聚合酶可以取代现有方案中的任何商业热启动Taq DNA聚合酶。考虑到缓冲液处方的差异，可能需要优化最终的MgCl2浓度和退火温度。
- KAPA Taq HotStart Buffer 是一种独特配方的缓冲液，可提供更高的特异性和灵敏度，并改善富含 GC 和 AT 模板的扩增。
- KAPA Taq HotStart Buffer 不含 MgCl2；MgCl2 (25 mM) 单独供应，以便在反应设置过程中具有更大的灵活性。
- KAPA Taq HotStart PCR Kit 适用于从基因组 DNA 中扩增长达 3.5kb 的片段，或从较不复杂的靶标中扩增 5kb 的片段。
质量
每批 KAPA Taq HotStart DNA 聚合酶经确认含 <2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA Taq HotStart PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试，没有污染的外切和内切核酸酶活性，满足 DNA 污染水平方面的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已完全解冻并混合。试剂可在 4℃ 保存，供短期使用(最长 1 个月)。恢复 -20℃ 长期储存。
其他说明
仅限研究用途，不可用于诊断。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
| NACRES | NA.54 |
产品性质
| 质量水平 | 100 |
| 保质期 | ≤18 mo. |
| 特点 | dNTPs included hotstart: no |
| 包装 | pkg of 250 U (KK1008) pkg of 2500 U (BK1001) pkg of 500 U (KK1016) pkg of 5000 U (BK1003) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| technique(s) | PCR: suitable |
| input | purified DNA |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
| 货号 | 组份 |
| KAPA Taq DNA Polymerase 5 U/µL | |
| 10X KAPA Taq Buffer A | |
| 10X KAPA Taq Buffer B | |
| MgCl2 25 mM | |
| KAPA dNTP Mix 10 mM each |
安全信息
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | does not flash |
| 闪点(C) | does not flash |
