产品说明
一般描述
cOmplete® Lysis-M无EDTA哺乳动物细胞蛋白质提取试剂含有温和去污剂(溶剂为25mM二甘氨酸缓冲液,pH 7.6)。cOmplete Lysis-M无EDTA试剂可用于从培养哺乳动物细胞的细胞质和细胞核中有效、温和地提取蛋白质。仅需在室温下5分钟,即可有效裂解哺乳动物细胞,无需刮擦、超声处理或冻融。
试剂盒包含的即用型cOmplete小型无EDTA蛋白酶抑制剂混合片剂,可与试剂盒的Lysis-M试剂配合使用。cOmplete Lysis-M无EDTA试剂提供了一种非常方便、有效的蛋白质提取方法,并且可以在初始提取步骤中抑制蛋白酶活性。cOmplete小型无EDTA蛋白酶抑制剂混合片剂含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。cOmplete小型无EDTA片剂能够有效抑制多种丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,但不能抑制金属蛋白酶。
提取的蛋白质可以通过使用固定化金属螯合亲和层析(IMAC)进一步纯化,或者在下游应用中进行分析。
应用
Lysis-M试剂适用于多种不同应用,包括报告分子分析(如β-半乳糖苷酶、荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶)、免疫分析(如蛋白质免疫印迹、ELISA、RIA)、蛋白质测定(如蛋白激酶A、蛋白激酶C和酪氨酸激酶)以及蛋白质纯化。此外,细胞裂解物可用于蛋白质测定,如考马斯染色和BCA(2′-苯甲酰氧基肉桂醛)蛋白质测定,并且可以通过透析除去试剂。
注意:cOmplete小型无EDTA片剂(包含在试剂盒中)可用于稳定金属蛋白质活性不受影响的提取物。由于EDTA会干扰IMAC(固定化金属螯合亲和层析),因此,在聚乙二醇标签融合蛋白的分离过程或后续测定中应优选使用cOmplete小型无EDTA片剂。
特点和优势
- 只需5分钟即可完全、温和地裂解哺乳动物细胞。
- 节省时间,无需刮擦、超声处理或冻融。
- 提取蛋白质得率比超声处理法更高。
- 保留蛋白质结构,因为试剂不会变性或改变蛋白质。
- 节约成本,一种产品可以抑制多种蛋白酶。
- 减少步骤,因为提取的蛋白质可以直接用于许多下游应用(甚至包括受EDTA影响的应用,如IMAC)。
- 预期用途:同时提取和保护哺乳动物细胞的可溶性蛋白质。
- 样品材料:培养物中的哺乳动物细胞(如Cos-7细胞,在细胞融汇时收集)。
- 所需时间:5分钟(在室温下裂解细胞)。
- 提取次数:20次(每次10 ml)。
- 有效抑制:丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶(但不抑制金属蛋白酶)。
包装
1个试剂盒包含2片。每片足够用于10mL提取物。可裂解多达100g的哺乳动物细胞。
储存及稳定性
cOmplete蛋白酶抑制剂片剂2–8 ℃储存,Lysis-M试剂15–25 ℃储存。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
法律信息
Roche is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.
cOmplete is a trademark of Roche
产品性质
manufacturer/tradename | Roche |
运输 | ambient |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
Lysis-M Reagent for protein extraction from mammalian cells | |
cOmplete Mini EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail Tablets supplied in EASYpacks |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Warning |
危险声明 | H315 - H319 |
预防措施声明 | P264 - P280 - P302 + P352 - P332 + P313 - P337 + P313 - P362 + P364 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 2 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |