产品说明
一般描述
来自罗马蜗牛的β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶是使用最广泛的具有硫酸酯酶活性的酶制剂，具有广谱特异性。它是酶的粗混合物，其制备不涉及任何色谱分离。该制剂含有葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶活性。在分析过程中，检测前的酶促水解对于实现高灵敏度必不可少。水解后，样品可通过质谱、气相色谱、HPLC或免疫检测进行分析。对于掺杂分析，除了葡萄糖醛酸酶活性之外，硫酸酯酶活性对于检测样品中存在的所有药物缀合物也是必不可少的。β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶还可用于生物液体(主要是尿液)中葡糖苷酸和硫酸酯的酶促水解。
特异性
β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶对多种β-葡糖苷酸和硫酸酯具有广谱特异性。
β-葡萄糖醛酸酶的特异性：
β-D-葡萄糖醛酸与多种羟基化合物形成的糖苷在β-葡萄糖醛酸酶存在下容易水解。
- 这些化合物包括类固醇，如雌三醇(Km = 0.42 mM，pH 4.5)、雄甾酮、孕二醇、四氢可的松，
- 酚类，如酚酞(Km = 0.39 mM)、4-硝基苯酚、4-甲基伞形酮，
- 氯霉素和四氢大麻酚等药物，
- 以及甲状腺素和胆红素等代谢产物。
β-葡萄糖醛酸酶对碳水化合物部分具有高度特异性：α-葡萄糖苷和β-葡糖苷酸均不会水解。但是，与β-葡萄糖醛酸残基相连的残基的性质几乎不重要。
比活: +38℃下，以酚酞-β-葡糖苷酸为底物，5.5 U/ml(+25℃下，以4-硝基-苯基-β-D-葡糖苷酸为底物，4.5 U/ml = +38℃下，以酚酞-β-葡糖苷酸为底物，100,000个Fishman单位)。+38℃下，1个Fishman单位在1小时内可从酚酞-β-葡糖苷酸释放1 μg酚酞。
芳基硫酸酯酶的特异性：
许多苯酚硫酸盐在芳基硫酸酯酶存在下会水解。实例是类固醇硫酸盐，例如硫酸雌酮、4-硝基苯硫酸氢盐(Km = 1.8 mM，pH 7.3)、4-硝基-邻苯二酚2-硫酸盐(Km = 1.25 mM，pH 7.5)和酚酞二硫酸盐。
比活:+38℃下，以酚酞二硫酸盐为底物，2.6 U/ml(+25℃下，以4-硝基苯硫酸盐为底物，14 U/ml = +38℃下，2-羟基-5-硝基苯硫酸盐为底物，800,000个Fishman单位)。+38℃下，1个Roy单位在1小时内可释放1 μg 2-羟基-5-硝基苯硫酸盐。
β-葡萄糖醛酸酶的特异性：
β-D-葡萄糖醛酸与多种羟基化合物形成的糖苷在β-葡萄糖醛酸酶存在下容易水解。
- 这些化合物包括类固醇，如雌三醇(Km = 0.42 mM，pH 4.5)、雄甾酮、孕二醇、四氢可的松，
- 酚类，如酚酞(Km = 0.39 mM)、4-硝基苯酚、4-甲基伞形酮，
- 氯霉素和四氢大麻酚等药物，
- 以及甲状腺素和胆红素等代谢产物。
β-葡萄糖醛酸酶对碳水化合物部分具有高度特异性：α-葡萄糖苷和β-葡糖苷酸均不会水解。但是，与β-葡萄糖醛酸残基相连的残基的性质几乎不重要。
芳基硫酸酯酶的特异性：
许多苯酚硫酸盐在芳基硫酸酯酶存在下会水解。实例是类固醇硫酸盐，例如硫酸雌酮、4-硝基苯硫酸氢盐(Km = 1.8 mM，pH 7.3)、4-硝基-邻苯二酚2-硫酸盐(Km = 1.25 mM，pH 7.5)和酚酞二硫酸盐。
应用
在研究和分析实验室中，β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶已广泛用于同时酶促水解类固醇β-葡糖苷酸和硫酸酯。在GC-MS、HPLC、免疫检测或其他分析方法(包括掺杂分析尿液和其他体液中类固醇结合物(葡糖苷酸)和硫酸酯的水解)之前，在样品制备过程中使用该酶切割葡糖苷酸和硫酸酯。
特点和优势
- 去结合后检测葡糖苷酸和硫酸酯。
- 快速筛选类固醇、苯二氮卓类、大麻素、阿片类药物和其他药物。
组分
EC 3.1.6.1 & 3.2.1.31
原理
葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原理之一。提供给人体的大多数物质都要经过代谢处理，包括在UDP-葡萄糖醛酸基转移酶(UGT)作用下与葡萄糖醛酸结合。该酶可催化葡萄糖醛酸基转移至许多生物学和具有药理学活性的内源性和外源性分子。与原来的分子相比，葡糖苷酸通常更易溶，毒性更小，且更易被人体排泄。
另外，在人体内，磺基转移酶可能会使药物或化学物质硫酸化。一般来说，硫酸化比葡萄糖醛酸化难预测，因为磺基转移酶有许多同工酶，而且化学物质的葡萄糖醛酸化与硫酸化之比存在个体差异。
单位定义
葡萄糖醛酸酶：
标准单位
标准单位β-葡萄糖醛酸酶活性是指在温度为+25℃和pH为4.5的条件下可使4-硝基苯基β-D-葡糖苷酸释放4-硝基苯酚的量增加1 μmM的酶活性。
酚酞单位
酚酞单位β-葡萄糖醛酸酶活性是指在温度为+38℃的条件下可使酚酞β-D-葡糖苷酸释放酚酞的量增加1 μmM的酶活性。
4.5个标准单位大约相当于5.5个酚酞单位。
Fishman单位
Fishman单位β-葡萄糖醛酸酶活性是指在温度为+38℃的条件下可使酚酞β-D-葡糖苷酸释放酚酞的量增加1 μg的酶活性。
1个标准单位大约相当于22,000个Fishman单位(1个酚酞单位相当于19,000个Fishman单位)。
芳基硫酸酯酶：
标准单位
标准单位芳基硫酸酯酶活性是指在温度为+25℃和pH为6.2的条件下可使4-硝基苯硫酸盐释放4-硝基苯酚的量增加1 μmM的酶活性。
酚酞单位
酚酞单位芳基硫酸酯酶活性是指在温度为+38℃和pH为6.2的条件下可使酚酞二硫酸盐释放酚酞的量增加1 μmM的酶活性。
5.4个标准单位大约相当于1个酚酞单位。
Roy单位
Roy单位芳基硫酸酯酶活性是指在温度为+38℃和pH为6.2的条件下可使2-羟基-5-硝基苯硫酸氢盐(4-硝基邻苯二酚2-硫酸盐)释放4-硝基邻苯二酚的量增加1 μg的酶活性。
1个标准单位大约相当于57,000个Roy单位(1个酚酞单位相当于308,000个Roy单位)。
外形
稳定的盐水溶液
制备说明
工作浓度：在许多应用中，该产品可在临用前用水稀释或不稀释直接使用。
注意：本β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶制剂的浓度非常高，某些应用必须稀释。此外，在原生质体的制备中，必须根据经验找到适用于给定酵母菌株的精确浓度。
储存条件(工作液)：注意：稀释制剂可分装后-15至-25℃储存；冻融次数不应超过一两次，与2至8℃储存相比，低温储存并不能延长产品的保质期。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
产品性质
| 质量水平 | 100 |
| 形式 | solution |
| 包装 | pkg of 10 mL (10127698001) pkg of 2 mL (10127060001) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| 最佳pH | 4.5-5.0 |
| 运输 | wet ice |
| 储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | nwg |
| 闪点(F) | No data available |
| 闪点(C) | No data available |
