产品说明
一般描述
标记效率:来自1μg 线性模板DNA的约10μg的全长地高辛标记RNA被转录。
检测时间:135分钟
样本材料
线性化质粒DNA:
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成,质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用;3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化,以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物:
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
通过这种方法,特定长度的DIG标记单链RNA探针通过体外转录被生成。在标准条件下,DIG-11-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中。DIG RNA标记混合物专门设计用于优化转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记
内含物
10x 溶液带有:10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
特异性
热灭活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。
应用
利用SP6,T7及T3 RNA聚合酶通过体外转录而使用地高辛-11-UTP进行RNA标记。DIG标记RNA已用于多种杂交技术:
- Northern blots
- Southern blots
- 斑点印迹
- 菌斑或克隆提升
- RNase保护实验
- 染色体, 细胞, 及组织切片原位
特点和优势
DIG RNA标记混合物专门设计用于来自Roche并配以优化的转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
质量
经DIG RNA标记试剂盒和DIG核酸检测试剂盒检测的功能。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
产品性质
形式 | solution |
质量水平 | 100 |
用途 | sufficient for 20 reactions |
包装 | pkg of 40 μL |
manufacturer/tradename | Roche |
环保替代产品特性 | Designing Safer Chemicals Learn more about the Principles of Green Chemistry. |
环保替代产品分类 | Aligned |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Warning |
危险声明 | H302 |
预防措施声明 | P264 - P270 - P301 + P312 + P330 - P501 |
危险分类 | Acute Tox. 4 Oral |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |