产品说明
一般描述
Duolink® 原位 检测试剂Green包含所有必需的Duolink 原位 试剂，以用于进行结合PLA® 探头的扩增和检测。检测探针含有一种荧光团(lex = 495 nm，lem = 527 nm)，其可以使用与Cy®2或FITC相同的滤光片进行显示。使用Duolink 原位 试剂进行实验可以在固定细胞和组织样品中，在单分子水平上对蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白质表达水平进行内源性检测。
特异性
绿色荧光检测试剂通常与FITC滤光片一起使用。
应用
Duolink® 原位检测试剂已被用于邻位连接测定：
- 检测来自冷冻大鼠脑切片
- 人胚肾 293 细胞 (HEK)
- 垂体组织中加压素和促性腺激素释放激素 (GnRH)的结合
Duolink®邻位连接检测(PLA®)可在单分子水平上对固定细胞和组织样品的蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白质表达水平进行内源性检测。
特点和优势
- 不需要过表达或基因操纵
- 特异性高(假阳性较少)
- 因滚环扩增而具有单分子灵敏度
- 可进行相对定量
- 无需特殊设备
- 比FRET更快、更简单
- 准确性高于免疫共沉淀
- 结果可直接发表
组分
- 5x连接 - 包含与PLA探针杂交的寡核苷酸和除连接酶外的连接所需的所有组分
- 1x连接酶(1单位/μL)
- 1x聚合酶(10单位/μL)
- 5xAmplification Green - 包含除聚合酶外的滚环扩增(RCA)所需的所有组分。它还包含用荧光团标记的寡核苷酸探针，其能与RCA产物进行杂交。
不包括在检测试剂盒中：
一抗、PLA探针、洗涤缓冲液、封固剂
制备说明
要进行完整的Duolink® PLA原位实验 ，您需要两种一抗(PLA、IHC、ICC或IF验证)识别两个靶表位。其他必需试剂包括来自不同物种的一对PLA探针(一个PLUS和一个MINUS)、检测试剂、洗涤缓冲液和封固剂。请注意，一抗必须来源于与Duolink® PLA探针相同的物种。使用标准免疫荧光检测设备进行分析。
储存及稳定性
将其组分储存在-20℃条件下。酶应始终保持冷冻(-20℃)，从冷冻室中取出时应将其置于冷冻块上。
其他说明
遵循Duolink®原位荧光方案使用本产品。还提供了一组简介
请访问我们的Duolink® PLA资源中心，了解有关如何运行Duolink®实验、应用程序、故障排除等的信息。
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法律信息
Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC
PLA is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
| NACRES | NA.32 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 产品线 | Duolink® |
| technique(s) | proximity ligation assay: suitable |
| 荧光 | λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38) |
| 适用性 | suitable for fluorescence |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
| WGK | WGK 2 |
