产品说明
应用
碱性磷酸酶可与抗体及其他蛋白质偶联而用于ELISA、免疫印迹和组织化学检测。它通常用于使蛋白质和核酸去磷酸化。当需要高灵敏度时,可用于蛋白标记。碱性磷酸酶也可用于使DNA或RNA的5′-末端去磷酸化以防止自连。在用碱性磷酸酶去磷酸化后,DNA或RNA也可用放射性标记的磷酸盐(通过T4多核苷酸激酶)进行标记。产物 P8361 已被用于去磷酸化 Dishevelled (Dvl),这是 Wnt/β-连环蛋白信号通路中的关键组分 。
使用该 ALP 酶开发了一项试验,以评估两种蛋白 CRP-1 和 CRP-2 的冷冻保护活性。该酶已用于抑制前列腺酸性磷酸酶的环核苷酸类似物的抑制研究(使用荧光试验)。它在检测系统中常用作“报告者”,即与特异性识别靶分子的蛋白(抗体、链霉亲和素等)偶联。碱性磷酸酶也被用于去磷酸化酪蛋白。
本产品在发酵或纯化过程中未使用任何动物源材料。
生化/生理作用
碱性磷酸酶使蛋白质和核酸去磷酸化。
碱性磷酸酶是由两个相等的亚单位组成的二聚体。这种酶是一种糖蛋白,含约 12% 的碳水化合物(6% 己糖和 6% 其他中性糖)。每个碱性磷酸酶分子含有四个锌原子和四个二硫键。在镁存在的情况下,碱性磷酸酶活性达到最大。对磷酸对硝基苯基磷酸酯、磷酸苯酯、磷酸酚酞、α-甘油磷酸酯、β-甘油磷酸酯、2-磷酸甘油酯、磷酸丙糖酯、葡萄糖6-磷酸、葡萄糖 1-磷酸、果糖 1-磷酸、果糖 6-磷酸、腺苷 5-磷酸腺苷 3-磷酸、磷酸烯醇丙酮酸和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等磷酸单酯的水解进行催化。 砷酸盐、半胱氨酸、碘、无机磷酸盐、焦磷酸盐、磷酸二异丙酯、三苯基磷酸盐、氟磷酸二异丙酯和 L-苯丙氨酸是碱性磷酸酶的一些强抑制剂。该酶在 pH 7.5-9.5.2 范围内最稳定,酶活性的最适 pH 为 pH 8-10。
单位定义
1 个 DEA 单元在 37 ℃、pH 9.8 条件下每分钟水解 1 μmol 4-硝基苯基磷酸盐。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-631-4 |
MDL编号 | MFCD00131849 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 200 |
重组 | expressed in Pichia pastoris |
形式 | solid |
specific activity | ≥4000 units/mg protein |
分子量 | apparent mol wt 160 kDa |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
储存分类代码 | 13 - Non Combustible Solids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | Eyeshields, Gloves, type N95 (US) |