产品说明

一般描述

PCR 核苷酸混合物 ^PLUS 是一种无色澄清的 dATP、dCTP、dGTP 钠盐溶液，在水中浓度为 10 mM，dUTP 浓度为 30 mM，PCR 级。这种核苷酸混合物可以直接加入到聚合酶链反应中。
使用dUTP 代替 dTTP 进行掺入可降解来自先前尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UNG) 反应的污染 PCR 产物，以防止先前扩增的携带污染。

应用

• 这种即用型核苷酸混合物是 dATP、dGTP 和 dCTP 钠盐的预混溶液，每种浓度为 10 mM，dUTP 浓度为 30 mM，溶于水中。这种混合物经过优化，可用于所有类型的扩增反应：PCR
• RT-PCR
• 防止携带污染

为了去除 PCR 或 RT-PCR 的污染，用 dUTP 代替 dTTP 掺入 PCR 产物中。随后的反应可用尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UNG) 处理。为避免需要重新打开反应小瓶，将小瓶在+20℃下温育，从而降解潜在污染的含尿嘧啶的扩增产物。在该步骤中，模板 DNA 和 RNA 不受影响，因为正常 DNA 不含尿嘧啶，并且RNA 不作为 UNG 的底物。在开始实际的热循环程序之前，通过在 + 95℃ 下孵育灭活 UNG。不耐热的尿嘧啶-DNA 糖基化酶尤其有用，因为在 + 95℃ 下孵育 2 min 后已完全灭活。来自 大肠杆菌 的天然酶需要将反应混合物在 + 95℃ 下孵育 10 min。短时间热处理可显著降低模板核酸流失的风险，模板核酸通常仅在低浓度下存在。这在进行 RT-PCR 时尤为重要。因此我们建议使用尿嘧啶-DNA 糖基化酶。
它已用于LightCycler PCR分析中，以鉴定鼻咽拭子中的百日咳博德特氏菌和副百日咳博德特氏菌。也已用于定量PCR(qPCR)分析。

特点和优势

PCR 核苷酸MixPLUS 可直接添加到扩增反应中。罗氏的PCR级核苷酸经过专门制造和纯化，具有最高的化学纯度。它们可用于扩增甚至少量的模板RNA和DNA。
提高产量和性能

• 选择一种方便即用型的4种核苷酸混合物。
• 获得最高的PCR和RT-PCR灵敏度。
• 坚持最高纯度 ( 99%) 的核苷酸

包装

1组包含4个即用型混合物

质量

在 PCR 中检测功能，以确保特异性 DNA 扩增。验证了 UNG 的去污。根据当前质量控制程序，未检出RNA酶或DNA酶。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

产品性质

形式	solution
质量水平	100
用途	sufficient for 500 reactions
包装	pkg of 2 × 100 μL (10 mM each)
manufacturer/tradename	Roche
technique(s)	RT-PCR: suitable
运输	dry ice
储存温度	−20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号	组份
	dATP, PCR Grade, sodium salt 10 mM
	dCTP, PCR Grade, sodium salt 10 mM
	dGTP, PCR Grade, sodium salt 10 mM
	dUTP, PCR Grade, sodium salt 10 mM

安全信息

储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash