产品说明
一般描述
胶原酶是一种蛋白酶，可切割被称为胶原蛋白的三螺旋蛋白。组织胶原酶有三种类型，它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的胶原酶具有非常强的活性，可在低至4-10℃的温度下从两端消化胶原蛋白。粗制胶原酶混合物主要含有两种的酶，即胶原酶和梭菌蛋白酶。
应用
来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的胶原酶适用于以下应用：
- Sertoli细胞分离
- 用于酶法的比较
- 组织制备，以用于免疫细胞化学分析
- 睾丸精子提取
- 单细胞悬浮液的制备
- 免疫荧光分析
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、成人和胎儿脑、肺以及许多其他上皮组织的解离。它还被证明能够有效用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞的分离和肝细胞制备。胶原酶还被用于制备动脉组织，以研究晚期糖基化终产物。经测试证明，该酶能够以约1 mg/mL的浓度释放肝细胞。消化浓度范围为0.1至5 mg/mL。
生化/生理作用
胶原酶产品是溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)分泌的酶混合物，不同的产品可通过分泌酶中10-18种组分的相对比例进行区分。主要成分是两种胶原酶，即梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞来说都是必需的。各种类型的胶原蛋白均是胶原酶的天然底物。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
注意
未开封的产品可在-20℃下稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下储存30天，FALGPA或蛋白酶活性无损失。如果将粗制胶原酶溶液分装(10 mg/mL)后快速冷冻并冷藏在-20℃下，可稳定保存。后续的冻融循环将破坏溶液。若将本品放在冰上，可在7小时内保持100%活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
制备说明
将XI型胶原酶以1-2 mg/mL溶于TESCA缓冲液(含有50mM TES，0.36mM氯化钙，pH 7.4，37℃)制备胶原酶溶液。
基本信息
| 酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
| EC 号 | 232-582-9 |
| MDL编号 | MFCD00130830 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 生物来源 | Clostridium histolyticum |
| 无菌性 | 0.2 μm filtered |
| 形式 | lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution) |
| specific activity | ≥800 units/mg solid |
| 分子量 | 68-130 kDa |
| 浓度 | 1 mg/mL |
| technique(s) | cell culture | mammalian: suitable |
| pH值(酸碱度) | 7.4 |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 象形图 |  |
| 警示用语： | Danger |
| 危险声明 | H334 |
| 预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
| 危险分类 | Resp. Sens. 1 |
| 储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
| 个人防护装备 | dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves |
