产品说明
应用
适用于:
- 平端和粘性DNA片段的连接
- 克隆载体和限制性插入片段的连接
- 双链DNA和RNA或DNA/RNA杂合体中的缺口补平
- 通过桥连寡核苷酸接头来偶联RNA单链
生化/生理作用
T4 DNA连接酶可在双链体DNA的相邻多核苷酸的末端之间形成能量依赖性的磷酸二酯键。连接反应需要ATP作为辅助因子。平末端片段的连接需要更高的酶浓度并可通过在反应混合物中使用PEG来促进。该酶需要3′羟基和5′磷酸基用于连接。可通过用碱性磷酸酶进行去磷酸化来防止载体DNA的自连。T4连接酶在DNA和RNA缺口的修复中可发挥积极作用。
组分
T4 DNA连接酶以溶于20 mM Tris-HCl(pH 7.5),50 mM KCl,1 mM DTT和50%(v/v)甘油的溶液形式提供。
单位定义
一个Weiss单位的定义是在37℃ 下,在20分钟内催化1 nmol的P32从焦磷酸盐交换至ATP作为Norit可吸收物质所需的酶量。
其他说明
T4 DNA连接酶可通过在65 ℃加热10分钟灭活。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 6.5.1.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-770-0 |
MDL编号 | MFCD00163508 |
NACRES | NA.53 |
产品性质
质量水平 | 200 |
等级 | for molecular biology |
形式 | buffered aqueous glycerol solution |
specific activity | 4,000 U/mL |
分子量 | 68 kDa |
UniProt登记号 | P00970 |
储存温度 | −20℃ |
Gene Information | bacteriophage T4 ... 30(1258680) |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US) |