产品说明
一般描述
一种基于非活性Cas9或dCas9与人类E1A结合蛋白p300的组蛋白乙酰化(HAT)催化核心结构域融合的基因激活系统。相较于dCas9-VP64或其它类似的基因激活机制,带有p300结构域的dCas9-p300 CRISPR Gene Activator代表了一种截然不同的基因激活机制。p300组蛋白乙酰化酶可将DNA从异染色质状态释放出来,并通过细胞内源机制维持基因持续高量的表达,从而开启了一条基因转录高速公路。Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化,以实现基于T7的mRNA表达。
应用
- 功能基因组/靶标确认表观遗传修饰
- 转录激活
特点和优势
- Sigma CRISPR dCas9p300质粒共表达p300-HAT和GFP可以方便地监测其在目的细胞内的传递和表达情况(图1)。gRNA可以成功介导核酸酶缺失的Cas9(dCas9)融合到p300HAT的催化结构域上,从而提升组蛋白乙酰化和内源基因的表达水平。相较于dCas9-VP64或其它类似基因激活基序,dCas9-p300组蛋白乙酰化方法代表着一种截然不同的基因激活机制。
组分
每管包含1ug dCas9-p300质粒。
联系
如需订购 U6-gRNA 质粒,请访问 sigma.com/crisprs
点击此处 了解更多关于 dcas9-p300 基因激活因子表达质粒的信息。
其他说明
必须与U6-gRNA表达质粒配套使用
基本信息
NACRES | NA.51 |
产品性质
质量水平 | 200 |
重组 | expressed in E. coli |
包装 | vial of 50 μL |
浓度 | 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA) |
application(s) | CRISPR |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | nwg |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |