产品说明

一般描述

Akt 是 PI3 激酶途径的主要已知效应子。PIP3 的产生导致 PDK1 激活，该蛋白使 Thr308 上的 Akt 磷酸化，另一种激酶复合物(一般认为是 mTORC2 复合物，或可能是连接两者的中间激酶)使 Ser473 上的 Akt 磷酸化。这些位点磷酸化可加成激活 Akt Ser/Thr 激酶活性，使用针对这些位点中任一位点的磷酸化状态特异性抗体可暗示 Akt 激活。Akt 的激活可以直接通过免疫沉淀，然后用放射性标记的 ATP 磷酸化已知底物来进行测量。研究表明，Akt 可以磷酸化 70 多种底物，包括 mTOR 信号传导中的 TSC1&2、BAD(Ser136)、GSK3(其可以通过这种磷酸化作用而失火)，转录因子 FoxO 家族 PRAS40、AS160。

特异性

识别 Akt1/PKBα，分子量 〜60 kDa。

免疫原

对应于大鼠 Akt1 的 C 末端(残基 466-480)的 15 个残基合成肽(C-RPHFPQFS YSASGTA)，并添加 N 末端半胱氨酸用于偶联。 Akt1 序列与小鼠 Akt1(15/15 个氨基酸)相同，在牛 Akt1(14/15 个氨基酸)和人 Akt1(13/15 个氨基酸)中高度保守。 人 Akt2 与肽免疫原序列共有 11/15 个氨基酸。
表位：C端

应用

该抗 Akt1/PKBα 抗体经过验证可用在 IP，WB 中检测 Akt1/PKBα。
免疫沉淀激酶测定：
4 µg 先前批次的抗体从 1 mg 用 IGF-1 刺激的 HEK293 细胞中免疫沉淀了活性 Akt。
研究类别
信号传导
研究子类别
PI3K、Akt & mTOR 信号传导

质量

通过蛋白质印迹对人 A431 癌细胞的 RIPA 裂解液进行了评估。

蛋白质印迹分析：
0.5-2 µg/mL 的该抗体在人 A431 癌细胞的 RIPA 裂解液中检测到 Akt。

目标描述

~60 kDa

外形

形式：纯化的
纯化的兔多克隆抗体，在含有 0.1 M Tris-甘氨酸，pH 7.4、0.15 M NaCl，0.05％ 叠氮化钠的缓冲液，然后添加甘油至 30% 的溶液中。
纯化的蛋白 A

储存及稳定性

自收到之日起，在 -20ºC 条下可稳定保存 1 年。

分析说明

对照
阳性对照包括：未刺激的 A431 细胞裂解液(12-301)。
其他对照：MCF7 全细胞裂解液
包括阳性抗原对照： 目录号 12-301，未刺激的 A431 裂解液。加入 2.5 µL 2-巯基乙醇/100 µL 裂解液，煮沸 5 分钟以减少制备量。 每个泳道上样 20 µg 还原裂解液以制备小凝胶。

其他说明

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

法律信息

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免责声明

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基本信息

产品性质

安全信息